[发明专利]以动物纤维蛋白为载体的注射型多种生物因子复合骨修复材料

说明书

一、所属领域

本发明涉及医学临床应用的一种骨修复材料，特别涉及一种用于临床骨折、 骨不连、骨缺损、骨质疏松等疾病，并可用于兽医学的以动物纤维蛋白为载体 的注射型多种生物因子复合骨修复材料。

二、背景技术

现有使用骨生长因子的方法为复合在固体材料上，通过手术植入创伤部位， 操作复杂，成本高，适用范围有限，尤其是对临床出现最多的闭合性骨折及其 它不需要手术治疗的病例难以应用。

三、发明内容

根据上述现有技术部分存在的缺陷或不足，本发明的目的是，提供一种用 于临床骨折、骨不连、骨缺损、骨质疏松等疾病，并可用于兽医学的以动物纤 维蛋白为载体的注射型多种生物因子复合骨修复材料。

本发明的构思是，采用哺乳动物血液为原料提取纤维蛋白原，并通过凝血 酶作用使之在应用时转化为纤维蛋白凝块。将纤维蛋白凝块作为骨形态发生蛋 白、成纤维细胞生长因子和β转化生长因子的缓释载体，利用上述生物因子的 骨诱导作用和促进创伤修复作用治疗骨折、骨不连、骨缺损及骨质疏松症等。

本发明采取的技术方案是：

以动物纤维蛋白为载体的注射型多种生物因子复合骨修复材料，按以下方 法制备：

1)无菌取猪、牛等哺乳动物抗凝血，分离血浆后以低温离心法提取纤维蛋 白原，冻干制成海绵状纤维蛋白原为本系统的第一部分；

2)凝血酶中加入一定剂量的重组人骨形态发生蛋白、成纤维细胞生长因子 和β转化生长因子组成本系统的第二部分。

其特征在于，上述第一部分与第二部分在注射到体内之前不混合，而是采 用边注射边混合的方式，并且：

3)第一部分以双蒸水为溶剂，使用前配成悬液；其中纤维蛋白原的浓度为 70mg/ml～110mg/ml；

4)第二部分以40mM/L的氯化钙为溶剂，凝血酶的浓度为500IU/ml，重组 人骨形态发生蛋白、成纤维细胞生长因子和β转化生长因子的浓度分别为5μ g/ml～20μg/ml、5mg/ml和1mg/ml。

本发明的另一特点是，所述重组人骨形态发生蛋白是基因工程表达的 BMP-2、BMP-4或BMP-7以及它们的混合物。

本发明利用纤维蛋白原在和凝血酶作用前可溶解于液体的特点制成注射 剂，因而不仅可用于需要手术治疗的骨不连、骨缺损患者，还可以使用普通注 射器经皮直接注射，因而可用于闭合性骨折、骨质疏松症等不需要手术的病例。 具有临床使用范围广泛、操作简便、治疗效果确切等优点。三种生物因子通过 基因工程学方法生产，均为水容性，纯度高，生物活性好。纤维蛋白为生物性 材料，因此生物相容性好，可以在短时间内被完全吸收。随着载体的吸收降解， 骨形态发生蛋白等生物因子缓慢释放出来，可以在创伤修复的全过程充分发挥 其生物学作用。研究表明，纤维蛋白免疫原性很低，植入体内后无不良反应。 由于取材于猪、牛等哺乳动物血液，因而不仅来源广泛，成本低，而且还避免 了传播肝炎、艾滋病等通过血液传播的疾病。

液态的纤维蛋白原溶液与溶解有生物因子的凝血酶混合后，在体内迅速固 化，并可以任意塑型成损伤部位的形状，使新骨形状完全恢复原由的生理形状， 对于肢体功能的恢复有重要意义。同时，纤维蛋白原的止血、粘接作用有利于 防治局部血肿的形成，加速软组织愈合，为骨的再生和愈合提供良好的局部环 境。

四、具体实施方式

以下结合实施例对本发明作进一步的详细描述。

实施例1：按照本发明的技术方案，以动物纤维蛋白为载体的注射型多种生 物因子复合骨修复材料，按以下方法制备：

1)无菌取猪、牛等哺乳动物抗凝血，分离血浆后以低温离心法提取纤维蛋 白原，冻干制成海绵状纤维蛋白原为本系统的第一部分；

2)凝血酶中加入一定剂量的重组人骨形态发生蛋白、成纤维细胞生长因子 和β转化生长因子组成本系统的第二部分。

3)第一部分以双蒸水为溶剂，使用前配成悬液；其中纤维蛋白原的浓度为 70mg/ml；

4)第二部分以40mM/L的氯化钙为溶剂，凝血酶的浓度为500IU/ml，重组 人骨形态发生蛋白、成纤维细胞生长因子和β转化生长因子的浓度分别为20μ g/ml、5mg/ml和1mg/ml。

重组人骨形态发生蛋白是基因工程表达的BMP-4。