[发明专利]液相色谱法测定独一味中8－O－乙酰基山栀子苷甲酯含量的方法

说明书

技术领域

本发明属于中药领域，涉及一种药品的检测方法，尤其涉及一种液相色谱法测定独一味中8-O-乙酰基山栀子苷甲酯含量的方法。

背景技术

独一味为传统藏药，相关制剂被临床广泛应用于各种外科手术后的镇痛止血及口腔科、妇科、关节炎等方面的治疗。《中国药典》要求测定独一味及其制剂中总黄酮及木犀草素含量，并设定了质量标准。但是大量药理实验表明以8-O-乙酰基山栀子苷甲酯为代表的环烯醚萜苷类成分具有很好的止血、镇痛作用，是独一味的活性物质基础。建立独一味制剂中8-O-乙酰基山栀子苷甲酯的含量测定方法，能更好地保障独一味药材及其相关提取物、制剂的质量。

发明内容

本发明的目的是为了提供一种液相色谱法测定独一味中8-O-乙酰基山栀子苷甲酯含量的方法。

本发明液相色谱法测定独一味中8-O-乙酰基山栀子苷甲酯含量的方法，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水为流动相，在检测波长230～240nm，流速0.5～2.0mL/min，进样量5～50μl的色谱条件下，将制备的样品溶液进行液相色谱分析，测定对照品溶液相应位置的色谱峰面积，按标准曲线计算相应的含量。

所述流动相中乙腈∶水的体积比为3∶100～40∶100(最佳为15∶85)。

所述对照品溶液的制备：精密称取经五氧化二磷干燥过夜的8-O-乙酰基山栀苷甲酯对照品，用水制成浓度介于0.1～100.0μg·ml^-1的梯度溶液。

本发明的测定方法适用于独一味药材及由独一味药材制得的提取物及制剂。

所述独一味制剂样品溶液的制备：将独一味制剂溶于甲醇或乙醇的任何比例的水溶液中，使8-O-乙酰基山栀子苷甲酯的浓度介于0.1～100.0μg·ml^-1，即得样品溶液。其中独一味制剂包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、软胶囊剂、分散剂、口服液体制剂、针剂、膜剂、气雾剂、散剂及外用制剂。

所述独一味药材样品溶液的制备：将独一味药材采用水提、醇提或超声提取，所得提取液稀释至8-O-乙酰基山栀子苷甲酯的浓度介于0.1～100.0μg·ml^-1，即得样品溶液。

所述独一味提取物样品溶液的制备：将独一味提取物溶于甲醇或乙醇的任何比例的水溶液中，稀释至8-O-乙酰基山栀子苷甲酯的浓度介于0.1～100.0μg·ml^-1，即得样品溶液。独一味提取物包括各种分离手段从独一味药材中得到的提取物，如独一味水提取物、独一味总皂苷、独一味总环烯醚萜苷等。

下面通过具体实验对本发明方法进行进一步说明。

(1)仪器与试药

高效液相色谱仪(美国Waters公司)，包括600型二元梯度泵、996型二极管阵列紫外检测器，BP210S电子分析天平(Sartorius公司)，SK7200H超声波清洗器(上海科导超声仪器有限公司)。8-O-乙酰基山栀苷甲酯对照品(实验室自制，MS，NMR确定其结构)，纯化水，乙腈为色谱纯(CaledonLaboratories LTD.Canada)。市场销售独一味制剂5种，见表1。

表1市售5种独一味制剂