[发明专利]从沙棘叶中提取总黄酮的工艺方法

说明书

技术领域

本发明属于天然产物化学领域，涉及天然产物提取、分离和纯化，特别涉及一种从沙棘叶中提取高纯度总黄酮的工艺方法。

背景技术

沙棘(Hippophaer hamrmides L.)为胡颓子科(Elaeagnaceae)酸刺属的灌木或小乔木。别名醋柳、黑刺、酸刺、其察日嘎纳(蒙名)、达普(藏名)、吉汗(维吾尔名)。中国是世界上沙棘分布面积最大，种类最多的国家，全世界95％以上的沙棘资源在我国。我国沙棘资源主要分布在西北、华北、东北及西南等十多个省区。沙棘是我国重要的天然植物资源之一，含有200多种化学成分，主要有维生素、有机酸、单糖、氨基酸、酞氨类、脂肪酸、脂类、酚类、黄酮、蛋白质、微量元素等，其中总黄酮是沙棘最重要和最活跃的活性成分之一，在沙棘的药用开发中占有重要的地位。沙棘的果实、叶和全株中都含有黄酮类化合物，而叶中黄酮类化合物的总含量明显高于果实和其它部位。

现代医学研究表明：沙棘总黄酮具有抗心肌缺血、抗心率失常，提高耐缺氧能力、降低血清胆固醇、抑制血小板聚集、抗溃疡、抗肿瘤、抗炎、抗过敏、抗氧化、抗衰老、抗辐射和抗菌、抗病毒及增强免疫等广泛的药理功效(Danel R，et al.J.Agric.Food Chem，2003，51：4233-4239；Zu Y G，et a1.J.Pharm.Biomed.Anal.，2006，41：714-719；肖卓殷，等.四川医学学报，1980，11(3)：174-176)。

目前沙棘总黄酮主要来源于从沙棘果实和沙棘籽榨油后、果实轧汁后的残渣为原料，提取分离沙棘黄酮。其提取方法主要有煎煮法、浸渍法、渗漉法、回流提取法、超声波提取法、微波萃取法、碱性助提剂提取法、超临界CO₂流体连续萃取法、大孔吸附树脂提取法等。上述提取方法存在生产周期长、提取率低、质量不稳定、生产成本高、产品纯度低等问题。

发明内容

针对上述现有技术中存在的缺陷和不足，本发明的目的在于提供一种从沙棘叶中提取高纯度总黄酮的工艺方法。

本发明的技术方案如下：

一种从沙棘叶中提取总黄酮的工艺方法，其特征在于将沙棘叶以热水煎提，将浓缩离心后的提取液经聚苯乙烯、聚丙烯酸、聚丙烯酸酯或聚甲基丙烯酸酯类大孔吸附树脂吸附以及解吸附，解吸液浓缩制成浸膏粗粉后，加酸水解，再以有机溶剂萃取，将有机相浓缩和喷雾干燥后即得。

本发明从沙棘叶制备总黄酮的工艺方法，包括以下步骤：

1)水提：称取阴干的沙棘叶，加入8～12倍量的水热提，过滤后合并提取液，料渣弃去；提取液减压浓缩，将浓缩液充分混匀后放置沉降，待上大孔色谱柱或树脂塔；

2)吸附以及解吸附：将浓缩并沉降后的沙棘叶提取液上清液上柱进行吸附，然后用水洗脱除去水溶性杂质，弃去水洗脱液，再用50～90wt％乙醇溶液解吸附，合并醇洗脱液后回收乙醇，剩余物浓缩至干，得到浅棕色提取物粗粉；

3)水解：向第(2)步所得沙棘叶提取物粗粉中加入6～20倍量的盐酸乙醇溶液进行水解，回流水解；

4)萃取：取第(3)步所得水解液，回收乙醇，然后用氢氧化钠溶液调pH值至7～9；加入弱极性或中极性有机溶剂进行萃取，重复萃取后弃去水相，合并浓缩萃取液，再进行喷雾干燥即得淡黄色至深棕色粉末产品。

在吸附以及解吸附树脂柱过程中，树脂塔柱径和柱高比为1∶10～15。

在吸附以及解吸附树脂柱过程中，向大孔吸附树脂中加入的样品量为按树脂对总黄酮静态饱和吸附量的120％。

在吸附以及解吸附树脂柱过程中，吸附速度为0.5～3BV/h(1BV为1个树脂床体积)。

在吸附以及解吸附树脂柱过程中，乙醇解吸附液的流速为0.5～2BV/h。

在萃取过程中，弱极性或中极性有机溶剂选自石油醚、正己烷、环己烷、乙酸乙酯、丙酮或正丁醇。

本发明从沙棘叶到该沙棘总黄酮产品的总浸膏得率大于1％，经紫外分光光度计法(UV)测定，该沙棘总黄酮产品中总黄酮的含量为20％～90％；经高效液相色谱法(HPLC)测定，该沙棘总黄酮产品中异鼠李素含量为5％～30％。而纯化前沙棘叶中总黄酮含量仅为0.5～2％，异鼠李素含量小于0.1％。

本发明与已有方法技术相比产品中沙棘总黄酮和异鼠李素的含量大为提高，生产成本低廉，工艺路线简单，适合工业化生产应用，可进一步促进沙棘总黄酮或异鼠李素作为药物、保健品或保健食品等多功能产品的产业化开发。

实施例1：