[发明专利]肿瘤血管靶向肽GX1

权利要求书

1、肿瘤血管靶向肽GX1，其特征在于：利用放射性核素⁹⁹Tc^mO₄^-标记GX1，并对其进行了质量鉴定，包括放化纯度、比活度、体内外稳定性及生物学活性。对⁹⁹Tc^m-GX1与肿瘤血管内皮细胞结合的特异性、亲和力及活体内肿瘤组织的靶向性和肿瘤组织的特异性分布特性进行了测试。

2、根据权利要求1所述的肿瘤血管靶向肽GX1，其制备方法是：所述的⁹⁹Tc^m标记的肿瘤血管靶向肽GX1，其制备方法是：

(1)利用放射性核素⁹⁹Tc^mO₄^-，采用直接法标记GX1；

(2)对⁹⁹Tc^m-GX1进行质量及生物学活性鉴定；

(3)构建人胃癌血管内皮细胞体外培养模型，对⁹⁹Tc^m-GX1与人胃癌血管内皮细胞体外培养模型结合的特异性、亲和力进行测试；

(4)对⁹⁹Tc^m-GX1在活体内肿瘤组织的靶向性和肿瘤组织的特异性分布特性进行测试。

3、根据权利要求2所述的肿瘤血管靶向肽GX1，其制备方法是：所述的⁹⁹Tc^mO₄^-直接法标记GX1，其实现方法是：采用抗坏血酸还原双半胱胺酸键(二硫键)，将其打开，暴露出巯基；连二亚硫酸钠还原⁹⁹Tc^mO₄^-，将+7的锝还原到+3、+4、+5；最后二硫键还原形成的巯基作为强螯合基团螯合低价态的⁹⁹Tc^m，生成⁹⁹Tc^m-GX1。

4、根据权利要求2所述的肿瘤血管靶向肽GX1，其制备方法是：所述的⁹⁹Tc^mO₄^-直接法标记GX1，其实现方法是：新鲜配制1mol/L抗坏血酸钠溶液20μL，依次加入50g/L连二亚硫酸钠溶液20μL，100μ LGX1溶液和2-5mCi的新鲜⁹⁹Tc^mO₄^-淋洗液100μL，反应体系pH值4.8，室温反应10min完成标记。

5、根据权利要求2所述的肿瘤血管靶向肽GX1，其特征是：对⁹⁹Tc^m-GX1与人胃癌血管内皮细胞体外培养模型结合的特异性、亲和力利用受体放射配基结合分析法进行了测试。

6、根据权利要求2所述的肿瘤血管靶向肽GX1，其制备方法是：所述的对⁹⁹Tc^m-GX1进行了质量及生物学活性鉴定，其实现方法是：测定所得⁹⁹Tc^m-GX1的放化纯度、比活度、体内外稳定性，⁹⁹Tc^m-GX1与HUVEC微观受体放射自显影术判定⁹⁹Tc^m-GX1对内皮细胞结合的能力，进行生物学活性鉴定。

7、根据权利要求2所述的肿瘤血管靶向肽GX1，其特征是：所述的⁹⁹Tc^m-GX1与人胃癌血管内皮细胞体外培养模型结合的特异性、亲和力测试方法是；构建人胃癌血管内皮细胞体外培养模型(Co-HUVEC)，利用微观放射自显影术、体外受体放射配基结合分析及竞争抑制分析⁹⁹Tc^m-GX1与人胃癌血管内皮细胞体外培养模型Co-HUVEC、HUVEC及SGC7901细胞、GES细胞结合的差异；利用多点饱和分析法设置不同的标记肽浓度，在人胃癌血管内皮细胞体外培养模型Co-HUVEC、HUVEC细胞上进行体外受体放射配基结合分析，定量分析GX1与内皮细胞亲和力的大小及受体密度。

8、根据权利要求2所述的肿瘤血管靶向肽GX1，其制备方法是：所述的⁹⁹Tc^m-GX1在活体内肿瘤组织的靶向性和肿瘤组织的特异性分布特性，其实现方法是：构建荷人胃癌移植瘤裸鼠模型，

(1)将⁹⁹Tc^m-GX1 100μ Ci，经裸鼠尾静脉注入荷人胃癌移植瘤动物模型体内，于注射后0.5h、2h、4h、8h、12h、18h、24h分批处死动物，取各脏器及肿瘤称重，测定各组织放射性计数，衰减校正后，计算各脏器每克组织注射剂量分布(％ID/g)，验证⁹⁹Tc^m-GX1是否具有肿瘤组织的特异性分布特性；

(2)将⁹⁹Tc^m-GX1 500μ Ci尾静脉注入荷人胃癌移植瘤模型体内，于注射后0.5h、2h、4h、8h、12h、18h、24h进行ECT显像，连续追踪观察24h，观察⁹⁹Tc^m-GX1在活体内肿瘤组织的靶向性。