[发明专利]双层膜状组织修补材料及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于组织工程的生物材料技术领域，具体涉及一种双层膜状组织修补材料及其制备方法。 

背景技术

皮肤是覆盖和保护体表的重要组织器官。由于炎症、溃疡、外伤、烧伤、肿瘤术后以及先天性畸形等原因常造成皮肤的缺损和异常。对于暴露的皮肤创面，在传统上使用最多的就是纱布。纱布多由棉花、软麻布和亚麻布加工而成，属于惰性材料，对创面的愈合无直接促进作用。随着对伤口愈合研究的深入，人们认识到不仅要覆盖创面，还必须帮助伤口愈合。由细胞外基质构成的生物材料就是其中比较理想的一类产品，其主要成分包括胶原、非胶原糖蛋白、弹力纤维、糖胺多糖、蛋白聚糖、与基质代谢相关的酶及细胞因子；为细胞的生存及活动提供适宜的场所，不仅是细胞的机械支持组织，而且是供给营养和免疫应答的场所，决定细胞的粘附与迁移，在创伤修复和纤维化、细胞的生长、分化、代谢和肿瘤发生及转移中起重要作用，并作为组织替代材料用于临床研究，在多种组织器官的修复中发挥着重要的作用。 

组织修补材料的促愈合作用表现在：具有一定的止血促凝作用，还可诱导多种细胞增殖分化；胶原蛋白不但可作为伤口凝血块的基底，而且是粒细胞、巨噬细胞、纤维母细胞的趋化性物质，为各种细胞的游走、附着、 增殖提供支架。组织修补材料在创面最终降解为机体修复细胞所必需的氨基酸，为创面修复提供营养物质。 

目前已商品化的双层膜状生物材料有Integra(Integra LifeSciences公司生产)，为双层基质的人工皮肤，真皮部分由牛肌腱的胶原蛋白及硫酸软骨素制成具有一定孔洞大小的支架，表皮层则由硅胶膜组成，可以控制伤口水气的蒸散，在伤口愈合过程，真皮层会与伤口结合，表皮层的硅胶膜可以在真皮层愈合后去除，再进一步做自体皮肤移植，美国FDA已在1996年核准Integra在烧烫伤治疗使用；其不足主要在于，由于其表面有不可降解的硅胶膜，不易观察创面早期的感染情况，不利于创缘表皮细胞的爬行和创面的封闭，后期揭掉硅胶膜还需要二次手术。 

发明内容

本发明的目的就是提供一种双层膜状组织修补材料及其制备方法，具有制备周期短、成本低、方法简便、易于操作的优点；所制备的双层膜状组织修补材料具有止血、防止体液流失、保护创面并促进创面愈合的功能，有良好的生物相容性，能用于修复皮肤缺损、控制创面感染、治疗难愈性的创面，同时还具有形状、大小和厚度易于改变的优点。 

本发明所提出的双层膜状组织修补材料，其特征在于：是由脱细胞膜状生物衍生材料作为表层，由成纤维细胞合成分泌的细胞外基质和细胞生长因子复合于生物支架材料内部形成基层，两者嵌合构成；所述的脱细胞膜状生物衍生材料为天然生物组织经脱细胞处理后所形成膜状生物医用材料，包括脱细胞小肠粘膜下层、脱细胞真皮基质、脱细胞筋膜、脱细胞膀胱粘膜下层、脱细胞羊膜、脱细胞硬脑膜的任一种；所述的成纤维细胞为自体或异体来源的成纤维细胞，或可向成纤维细胞分化的干细胞，包括骨髓间充质干细胞、脂肪间充质干细胞、造血干细胞、皮肤干细胞、间充质干细胞、肌肉干细胞，肝脏干细胞、神经干细胞的任一种；所述的生物支架材料是能为细胞生长提供三维空间的支撑材料，包括纤维蛋白原、纤维蛋白、海藻酸盐、胶原蛋白、透明质酸、硫酸软骨素、壳聚糖、水凝胶、明胶、聚乳酸、聚羟基乙酸的任一种或是几种的混合。 

本发明所述的双层膜状组织修补材料的制备方法，包括有细胞获取、脱细胞膜状生物衍生材料制备以及双层膜状组织修补材料的构建，具体步骤如下： 

步骤1).成纤维细胞的获取：人成纤维细胞按常规的培养方法进行体外培养和大规模扩增培养；