[发明专利]一种酶解和发酵联用提高羊骨中钙转化率的方法无效

专利信息
申请号: 200810152360.8 申请日: 2008-10-17
公开(公告)号: CN101422249A 公开(公告)日: 2009-05-06
发明(设计)人: 马俪珍;甄润英;梁丽雅;任小青;张建荣 申请(专利权)人: 天津农学院
主分类号: A23L1/312 分类号: A23L1/312;A23L1/305;C12P3/00;C12N1/14;C12N1/16
代理公司: 天津市鼎和专利商标代理有限公司 代理人: 李 凤
地址: 300384*** 国省代码: 天津;12
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摘要:
搜索关键词: 一种 发酵 联用 提高 羊骨中钙 转化 方法
【权利要求书】:

1.一种酶解和发酵联用提高羊骨中钙转化率的方法,其特征在于步骤包括:

1)、制备羊骨酶解液

取新鲜羊骨烘干、磨粉,配成浓度为0.2kg/L的溶液,按每克骨粉1900U活力单位向溶液中添加胃蛋白酶,酶解;酶解温度37℃,酶解时间3~8h,pH值3.0;酶解结束后,90℃灭酶10min;冷却,备用;

2)菌种活化

将植物乳杆菌、戊糖片球菌按1%接种量分别接入经121℃、15min灭菌的液体MRS培养基中,37℃培养,活化三代后菌数达到107~108cfu·mL-1即可;

3)菌种驯化

A、制备驯化用梯度系列培养基

取液体MRS作为第一梯度培养基;按体积比酶解液∶液体MRS=1∶4制成第二梯度培养基;按体积比酶解液∶液体MRS=2∶3制成第三梯度培养基;按体积比酶解液∶液体MRS=3∶2制成第四梯度培养基;按体积比酶解液∶液体MRS=4∶1制成第五梯度培养基;

B、将植物乳杆菌或戊糖片球菌分别接种于第一梯度培养基,置37℃恒温摇床培养,每隔5h观察一次培养状态;在整个驯化过程中,每个驯化梯度反复驯化直至在9~10h内培养基出现明显浑浊同时菌落总数达到107~108cfu·mL-1,即转接到下一个梯度培养基中继续驯化;

4)、发酵羊骨酶解液

向步骤1)所得羊骨酶解液中按其质量2~10%的量接种驯化后的植物乳杆菌单体、戊糖片球菌单体或它们按1∶0.5~1∶5的比例混合的菌种,并按其质量3.93%的量添加葡萄糖,调pH为5,温度35℃,在恒温振荡器中连续发酵酶解液10~20h,得高钙羊骨酶解发酵液。

2.根据权利要求1所述的酶解和发酵联用提高羊骨中钙转化率的方法,其特征在于所述驯化菌种是驯化后的植物乳杆菌和驯化后的戊糖片球菌1∶1混合的菌种。

3.根据权利要求1所述的酶解和发酵联用提高羊骨中钙转化率的方法,其特征在于按所得羊骨酶解液重量的8.7%的量接种驯化菌种。

4.根据权利要求1所述的酶解和发酵联用提高羊骨中钙转化率的方法,其特征在于在恒温振荡器中连续发酵酶解液18.9小时。

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