[发明专利]一种生产α-干扰素的纯化方法

权利要求书

1、一种生产α-干扰素的纯化方法，步骤包括：

(1)重组菌株进行发酵；

(2)离心发酵液(6000rpm，离心15min)取上清，通过微滤除杂、超滤浓缩；

(3)用醋酸调节浓缩液的pH至5，并过阳离子层析柱(CM Sepharose柱层析)，收集0.45mol/L的目标洗脱峰；

(4)加入硫酸铵30％(v/v)至稍混浊，离心取上清(7000rpm，离心10min)；

(5)过Sephacryl S-200层析柱，通过SDS-PAGE检测收集目标洗脱峰；

(6)过Sephadex G-75色谱柱，通过SDS-PAGE检测收集目标洗脱液；

(7)得到纯度高于97％的干扰素原液，置于4℃保存。

2、权利要求1所述的方法，其中在实施步骤5之前，先去热原，用50mmol/L，pH5.5的醋酸缓冲液平衡，上样。

3、权利要求2所述的方法，其中去热原的方法包括高温法、吸附法、超滤法、蒸馏法、酸碱法、其它方法等，优选是吸附法。

4、权利要求1所述的方法，其中在实施步骤6之前，将充分浸泡后的SephadexG-75凝胶装入色谱柱中，去热原，用10mmol/L、pH7.0的PBS缓冲液平衡，上样。

5、权利要求4所述的方法，其中去热原的方法包括高温法、吸附法、超滤法、蒸馏法、酸碱法、其它方法等，优选是吸附法。

6、权利要求1—5中任一项所述的方法，其中所述的重组菌株大肠杆菌工程菌、酵母(如毕赤酵母)工程菌、重组病毒，优选酵母工程菌。

7、权利要求1—5中任一项所述的方法，其中所述的α干扰素畜用α干扰素、禽类α干扰素、鱼类α干扰素，优选猪α干扰素。