[发明专利]地衣芽孢杆菌外膜蛋白提取工艺无效
申请号: | 200810154338.7 | 申请日: | 2008-12-23 |
公开(公告)号: | CN101759771A | 公开(公告)日: | 2010-06-30 |
发明(设计)人: | 王小娥;苏建东;李旭东 | 申请(专利权)人: | 天津瑞普生物技术股份有限公司 |
主分类号: | C07K1/34 | 分类号: | C07K1/34;C07K1/14;C07K14/32 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 300300 *** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 地衣 芽孢 杆菌 膜蛋白 提取 工艺 | ||
1.一种用于地衣芽孢杆菌外膜蛋白的提取方法,步骤包括:
(1)利用超声波进行地衣芽孢杆菌细胞的破壁;
(2)粗提物进行6000rpm,15min离心,3次,取上清液2L;
(3)在上清中加15ml 2%十二烷酰肌氨酸钠溶液充分混匀,室温作用1h,于4℃100,000r/min超速离心1h;
(4)将沉淀用0.6mL 0.1moL/L PBS(pH7.4)和等量2%十二烷酰肌氨酸钠溶解,室温作用2h,于4℃100,000r/min超速离心1h,将沉淀适量的溶于0.1moL/L PBS(pH7.4)中;
(5)经过透析、超滤处理后,分装。
2.权利要求1的方法,其中所述的超声波的工作参数,优选功率450w、破碎时间2s、间断1s、反复破碎80次。
3.权利要求1或2的方法,其中所述的超滤,优选使用0.45μm的微孔滤膜或截留分子量为8600道尔顿的超滤膜(层析柱等)。
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