[发明专利]一种米蛋白糖基化改性的微波制备方法在审
申请号: | 200810155547.3 | 申请日: | 2008-10-09 |
公开(公告)号: | CN101381399A | 公开(公告)日: | 2009-03-11 |
发明(设计)人: | 陈正行;华静娴;张燕萍;王韧 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C07K1/00 | 分类号: | C07K1/00;C07K1/14 |
代理公司: | 无锡市大为专利商标事务所 | 代理人: | 殷红梅 |
地址: | 214112江苏省*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 蛋白 糖基化 改性 微波 制备 方法 | ||
1.一种米蛋白糖基化改性的微波制备方法,其特征是:采用以下工艺步骤:其配方组成以g/L或mg/mL计:
(1)、米蛋白的制备:先将大米在水中浸泡,浸泡时大米与水的料液比为1∶3,浸泡2~3小时后进行打浆,打浆使用捣碎机,捣碎机转速8000~10000rpm;打浆后进行碱提,碱提温度:40~50℃,碱提时间:2~3小时,碱液为0.1mg/mL的氢氧化钠;碱提后进行离心,离心转速3000~5000rpm;然后对离心得到的上清液进行酸沉,酸沉使用0.1mol/L盐酸,调节pH值为:4.5~5.0;酸沉后再次进行离心,并对离心得到的沉淀进行水洗,水洗至中性pH值为:6.5~7.5;最后进行冷冻干燥成米蛋白,冷冻干燥温度为:-50℃;
(2)、取米蛋白8~10g,加入去离子水0.8~1L;调节pH值至12.0~12.5,磁力搅拌10~20min得到米蛋白悬浊液;
(3)、将米蛋白悬浊液倒入容器中,置于微波炉加热,微波加热至70~80℃,使米蛋白充分溶解;
(4)、米蛋白充分溶解后立即冰浴冷却至室温,pH值调至10.5~11.0,离心过滤除去不溶物,所得上清液即为米蛋白溶液,使用去离子水将米蛋白溶液稀释到浓度为2~8mg/mL;离心速度为3000~5000rpm,离心时间20~30min;
(5)、取米蛋白浓度为2~8mg/mL的米蛋白溶液200mL,加入多糖使米蛋白与多糖的质量比为1∶3~1∶6,混合均匀后倒入容器中进行微波加热,微波加热至75~90℃条件下反应4~5min后,将蛋白溶液冰浴冷却至室温,而后重复微波加热和冰浴冷却的步骤4~6次,使总反应时间达到20~30min;所述多糖为葡聚糖或玉米糊精或壳聚糖;
(6)、将微波处理后的米蛋白反应液用0.1mol/L的盐酸调pH值至6.5~7.5后,进行冷冻干燥处理,冷冻干燥温度为-50℃,然后粉碎过80~100目筛后得到米蛋白-多糖复合物的固态粉末。
2.根据权利要求1所述的一种米蛋白糖基化改性的微波制备方法,其特征在于所述微波功率为300~500W。
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