[发明专利]血中中性脂肪减少组合物

说明书

本申请是分案申请，其母案是申请日为2001年9月28日、申请 号为01819556.3、发明名称为“血中中性脂肪减少组合物”的申请。

技术领域

本发明涉及中性血脂减少组合物。

背景技术

植物蛋白当中，大豆蛋白不仅具有卓越的营养性能而且最近还发 现具有各种各样生理学功效，并作为生理学功能剂正成为一种令人瞩 目的食品材料。

大豆蛋白的中性血脂减少效应现已公认基于大豆蛋白对体内脂肪 的减少效应，其机理据Iritani等人报告(《J.Nutr.(营养学杂志)》， 126，380，1996)是对肝脏中脂肪酸合成酶活性的抑制作用。另外， 曾研究了完整大豆球蛋白，7S球蛋白和11S球蛋白中每一种，对于血 液中和肝脏中脂肪的作用，一般均报道在减少血液胆固醇或中性脂肪 的能力上比作为动物蛋白的酪蛋白更优异(Okita等人，《J.Nutr.(营 养学杂志)》，27，379，1981)。

还报道过11S球蛋白-缺少的大豆，即富含7S球蛋白的种子，可 通过繁殖获得(Breeding Science《繁殖科学》，46，11，1996)， 还报道过其应用(《繁殖科学》Breeding Science，50，101，2000) 及其专利(US6，171，640B1)。

然而，大豆蛋白，包括7S球蛋白，已知与肌醇六磷酸生成配合物 并从而对大豆蛋白的消化产生不利影响(M.A.Ritter等人，J.Food Sci. 《食品科学杂志》，52，325，1987)。

作为大豆衍生的蛋白，对作为细胞质膜成分以及作为蛋白体或油 体膜的极性脂具有高亲和力的蛋白，已由Samoto等人鉴定并命名为“油 体缔合蛋白”。油体缔合蛋白是一类蛋白的统称，主要由膜蛋白，尤 其是分子量按SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定为34kDa、24kDa和18 kDa，并作为含约10～12wt％可用2:1氯仿:乙醇极性溶剂混合物萃取 的极性脂的级分存在的那些，且据Samoto等人报道以占工业生产的分 级大豆蛋白高达约35％的数量产出(B.B.B.，62(5)，935-940(1998))。 油体缔合蛋白味道很差且具有高变应原性。

然而，鉴于油体缔合蛋白在常用来确定大豆蛋白组成的SDS-聚丙 烯酰胺凝胶电泳法中仅略微染色，故其估计含量变得远比其实际含量 小或甚至可忽略不计。于是，传统的分级处理仅着眼于7S和11S上， 而对油体缔合蛋白这种污染每一个级分的成分却不予理会。但是，从 生理学观点来看，为了制取较高纯度的7S和11S必须考虑到这些油体 缔合蛋白的性能。

为有效地从大豆蛋白中制备7S球蛋白，同时在配合物分解中切断 肌醇六磷酸的配合物键合并抑制油体缔合蛋白的污染作用从而提高纯 度，不仅对于用作旨在减少中性血脂的极其安全药物材料而且对于用 作食品材料都是非常重要的。

发明目的

本发明的目的是从大豆蛋白中制取一种具有中性血脂减少能力的 级分并处理该级分以提高其能力，从而以食品或医药形式提供用。

发明概述

我们做了深入研究并获得以下发现。

(1)当采用作为分级大豆蛋白的标准程序的Thahn和Shibasaki方 法从脱脂大豆中除掉11S球蛋白，随后从中分级出7S球蛋白时，不采 用任何还原剂(reducing agent)就可能实现高达50％或更高纯度的分 级。

(2)当上面描述的7S球蛋白和切断肌醇六磷酸与7S球蛋白的键合 以后获得的7S球蛋白(以下称肌醇六磷酸减少的7S球蛋白)接受在鼠 体内以酪蛋白作为对照样的21日研究时，7S球蛋白和肌醇六磷酸减少 的7S球蛋白表现出比酪蛋白更优异的中性血脂减少能力，其中肌醇六 磷酸减少的7S球蛋白表现出特别高的中性脂肪减少效果。

(3)响应该中性脂肪减少效应的开始，血液胆固醇水平下降。虽然 7S球蛋白和减少的肌醇六磷酸减少的7S球蛋白都显示出此种胆固醇 降低的能力，但HDL-胆固醇(HDLC)水平则毋宁说是由于肌醇六磷酸减 少的7S球蛋白的作用而改善的。

HDLC是所谓回收多余胆固醇的好胆固醇，而HDLC水平的改善，当 与总胆固醇降低效应相结合时，将导致动脉硬化指数大幅降低。

动脉硬化指数＝(总胆固醇-HDL胆固醇)/HDL胆固醇。