[发明专利]藏獒精液冷冻稀释液

说明书

技术领域

本发明涉及一种藏獒精液冷冻稀释液，用于藏獒精液的冷冻及人工授精，属于动物繁殖技术领域。

背景技术

犬的精液冷冻具有很高的应用价值，使用犬的精液冷冻与人工授精技术比自然繁殖具有诸多的优越性。如：可以高度发挥优秀种犬的利用率；减少各种疾病的传播，特别是生殖系统疾病的传播；不受时空限制，引种方便快捷，而且成本低效益高；种质资源可以得到有效保存，特别是对我国藏獒的品种保护和发展具有重要的现实意义。

目前，我国在藏獒精液冷冻与人工授精方面研究较少，且在繁殖方面未见比较全面的资料报道。藏獒属于青藏高原的一个物种，传说纯种藏獒分布于我国的甘肃、青海、四川省交界黄河第一湾--河曲。河曲藏獒被认为是真宗藏獒品群，享有“东方神犬”美誉。藏獒长期受高海拔、低气温、低氧量的生态环境影响，具备体型高大，性格刚毅凶猛等特点，深受我国甚至世界藏獒爱好者的称赞。近20年来，藏獒文化、经济得到了快速的发展，藏獒养殖已使牧民形成了致富的产业，给牧民带来了数以千万经济收入。但是，由于牧民对优秀纯种藏獒血统保护意识薄弱，随意买卖，原始藏獒与当地牧羊犬血统混杂近亲繁殖等，导致优秀纯种藏獒越来越少，这一珍稀犬种濒临灭绝的危机。据统计在我国纯种藏獒不足百条，如今即使在青藏高原的原产地，想寻求一条纯种藏獒也是很困难的。其次藏獒繁殖的季节性强，母獒每年只有一次发情，制约了纯种藏獒的繁殖和培育。且藏獒精子与其它犬科动物的精子类似，在冻融过程中对低温损伤的抗性较弱，冻融后精子活力下降，受孕率及窝产仔平均数均低于自然繁殖。藏獒自然繁殖时的受胎率和窝产仔平均数低于其他犬种，约分别为80％～85％，5～7只。因此，如何长期低温保存优质纯种藏獒精液并充分利用优良种源是本领域迫在眉睫需解决的问题。

影响犬精液冷冻成功与否的关键因素之一是稀释液配方，稀释液质量的优劣直接影响藏獒精液冷冻与人工受精的成败。目前国内外进行犬冷冻精液研究中应用最广泛的稀释液有两类：一类是卵黄-乳糖稀释液，其主要成分是卵黄、乳糖、甘油和抗生素类；另一类是卵黄-tris稀释液，其主要成分是tris(三羟甲基)、柠檬酸、果糖、甘油和卵黄，使用的抗菌素多为青霉素、链霉素和庆大霉素。由潘寿文和禹学礼等实验证实两种稀释液中，卵黄-tris稀释液优于卵黄-乳糖稀释液。(潘寿文等，畜牧与兽医，1986；(3)：105-106；禹学礼等，洛阳农业高等专科学校学报1999；(2)；20～23；河南科技大学学报，2004；(2)；32-36)。但是就目前研究水平与自然繁殖相比，受胎率和窝产仔平均数还存在一定差距。

发明内容

鉴于现有技术的不足，本发明提供一种藏獒精液冷冻稀释液，该稀释液进一步降低了藏獒精子在冷冻过程中受过冷刺激所造成的损害，提高了冻精的活力、复苏率、顶体的完整率等，从而使受胎率和窝产仔平均数明显提高，达到或接近了自交水平。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：一种藏獒精液冷冻稀释液，该稀释液以1液为基础，取1液35～55mL，配犊牛血清20～30mL、卵黄20～25mL、甘油5～10mL、青霉素1000IU/mL混合而成，且该稀释液的渗透压为300～330mosmo/L，pH值为6.5～7.0；其中1液的各组分及重量为：氯化钙0.20～0.50g、氯化钾0.18～0.36g、氯化镁0.22～0.45g、氯化钠3.5～5.85g、磷酸二氢钠0.30～0.55g、碳酸氢钠1.38～3.20g、丙酮酸钠0.025～0.036g、加双蒸水定容至1L而成。

本发明优选的配方是：一种藏獒精液冷冻稀释液，该稀释液以1液为基础，取1液50mL，配犊牛血清25mL、卵黄20mL、甘油5mL、青霉素1000IU/mL混合而成，且该稀释液的渗透压为325mosmo/L，pH值为6.8；其中1液的各组分及重量为：氯化钙0.30g、氯化钾0.25 g、氯化镁0.32 g、氯化钠5.85 g、磷酸二氢钠0.45g、碳酸氢钠2.38g、丙酮酸钠0.025g、加双蒸水定容至1L而成。为藏獒精子存活提供最佳基质条件。

本发明藏獒精液冷冻稀释液有以下用途，一是用于藏獒精液低温保存，另一用途是用于藏獒精液冷冻保存，如果去掉甘油等低温保护剂，则还可用于藏獒精液的常温保存。