[发明专利]西甜瓜品种蔓枯病抗性快速鉴定方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物病害抗性鉴定的技术领域，尤其是涉及一种西甜瓜品种蔓 枯病抗性的快速鉴定方法。

背景技术

西甜瓜植物在全世界范围内广泛栽培，以其营养价值高、产值好，备受消 费者和广大农民的欢迎。西甜瓜品种很多，而西甜瓜植物的蔓枯病(stem blight) 是一种危害非常严重的病害，育种学家、植物病理学家和农民等都非常关注。 西甜瓜蔓枯病无论在保护地或露地栽培均有发生，其病原无性世代为半知菌亚 门，瓜壳二孢真菌(Didymella bryoniae(Auersw.)Rehn)，有性世代为子囊菌 亚门，甜瓜球腔菌，病菌以分生孢子器和子囊壳在病残体或土壤越冬，翌年以 分生孢子进行初次侵染，通过气流、水、土壤传播，也可由带菌种子传播。该 病在西甜瓜的幼苗期至采收期均可发生，植株的地上各部均能被侵染，生育前 期易发病，生殖生长盛期达高峰。无论是在冬春日光温室，还是早春和秋后大 棚栽培均有发生，其危害程度远高于西甜瓜枯萎病和疫病，在生产上若不及早 防治，植株死亡率可达30％～40％，造成严重减产。目前该病的防治措施主要 是种子消毒、无菌苗移栽、水肥科学管理和药剂保护等，其中，农业防治效果 有限，化学防治又容易产生抗药性、农药残留和环境污染，因此，推广使用西 甜瓜抗性品种是最为经济有效的办法。但抗性品种的应用必须与快速、准确、 简单的病害抗性鉴定方法相结合，才有利于该西甜瓜抗性品种的推广。以往国 内外对西甜瓜蔓枯病的抗性鉴定主要是活体鉴定，比如3-4叶期的真叶瓜苗， 或者开花期的瓜苗通过西甜瓜蔓枯病孢子悬浮液的喷雾接种。但这种方法既要 求条件较高，如苗子需要在保温、保湿条件较好的温室中种植，才有利于喷雾 接种，苗子的数量要求也较多，而且接种至调查结果的时间较长，一般需15 天左右才能看出不同品种之间的抗性差异。因此，生产上急需有一种西甜瓜品 种蔓枯病抗性快速、简易鉴定的方法。

发明内容

本发明目的是，针对现有西甜瓜品种蔓枯病抗性鉴定方法所存在的对设备 条件要求较高，以及接菌种至调查出结果的时间较长等缺陷，提出一种简便、 快速、准确的西甜瓜品种蔓枯病抗性鉴定的方法。

本发明目的是通过以下技术方案予以实现。

西甜瓜品种蔓枯病抗性快速鉴定方法，该方法按如下步骤进行：

(1)植株苗子准备：西甜瓜种子消毒、播种，出苗后长至3-5片真叶，备 用；

(2)蔓枯病菌孢子悬浮液的准备：将西甜瓜蔓枯病菌接种在PDA培养基 上，并在紫外灯下处理4d诱导产孢；用灭菌水洗下孢子，配成5×10⁵个/mL 孢子悬浮液，备用；

(3)培养皿准备：取9cm直径培养皿，底部铺设用11.8mg/L苯骈咪唑 (Benzimidazole)植物保鲜水溶液浸湿的滤纸，消毒后，备用；

(4)叶片准备：取步骤(1)苗子第3-5片真叶剪成3cm×5cm的叶条， 平展置于步骤(3)培养皿滤纸之上，备用；

(5)孢子接种：把步骤(2)孢子悬浮液用软毛笔接种至步骤(4)培养皿 内的叶条上；另设内含不接种病菌叶条的培养皿为对照；

(6)保温、保湿培养：把步骤(5)培养皿放置人工气候箱内，温度调至 25-30℃下进行培养，培养皿内每天添加一次植物保鲜水溶液1-3mL；

(7)病情调查：接种培养3-5天后，按以下分级标准进行病情级数的调查， 并划分出病情指数：

0级 叶片没有发病

1级 叶片发病面积在10％以下

3级 叶片发病面积在10％-25％之间

5级 叶片发病面积在25％-50％之间

7级 叶片发病面积在50％-75％之间

9级 叶片发病面积在75％-100％之间

病情指数＝∑[病级株数×该级代表数值]×100/(调查总株×发病最高一级代 表数值)

免疫(I)   病情指数0

高抗(HR)  病情指数0.01-15

抗病(R)   病情指数15-35

中抗(MR)  病情指数35-55

感病(S)   病情指数55-75

高感(HS)  病情指数75-100。

本发明的有益效果：