[发明专利]采用甲基丙烯酰氧丙基凝胶制备固定化脂肪酶的方法有效
申请号: | 200810162594.0 | 申请日: | 2008-12-04 |
公开(公告)号: | CN101514338A | 公开(公告)日: | 2009-08-26 |
发明(设计)人: | 杨立荣;杨光;徐刚;吴坚平 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12N11/04 | 分类号: | C12N11/04 |
代理公司: | 杭州求是专利事务所有限公司 | 代理人: | 张法高 |
地址: | 310027*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 采用 甲基 丙烯 丙基 凝胶 制备 固定 脂肪酶 方法 | ||
1.一种采用甲基丙烯酰氧丙基凝胶制备固定化脂肪酶的方法,其特征在于它 的步骤如下:
1)加入摩尔比为3∶1~1∶3,总摩尔数为4mmol的γ-甲基丙烯酰氧丙基 三甲氧基硅烷、γ-甲基丙烯酰氧丙基三乙氧基硅烷或γ-甲基丙烯酰氧丙基甲基二 甲氧基硅烷与正硅酸甲酯或正硅酸乙酯,在200~300rpm下搅拌混合,加入0.5ml 的去离子水和30-50μl的0.1M的酸或碱催化剂,0-25℃下继续搅拌30~60min, 得到均匀的溶胶;
2)向溶胶中加入pH为7.0~9.0,浓度为0.03~0.06M的缓冲液,缓冲液含 有0.005-0.04g/ml溶胶的脂肪酶,缓冲液的用量为0.5~1ml,继续搅拌10~30min 后,在100~150rpm搅拌1~2h;
3)在4~10℃下静置老化12~24h,于30~35℃真空干燥3-7天,研磨, 得到固定化脂肪酶。
2.根据权利要求1所述的一种采用甲基丙烯酰氧丙基凝胶制备固定化脂肪 酶的方法,其特征在于所述的脂肪酶为Candida rugosa、Candida antarctica、 Arthrobacter sp.、Mucor miehei或Candida lipolytica脂肪酶。
3.根据权利要求1所述的一种采用甲基丙烯酰氧丙基凝胶制备固定化脂肪 酶的方法,其特征在于所述的酸催化剂为盐酸、硫酸或硝酸。
4.根据权利要求1所述的一种采用甲基丙烯酰氧丙基凝胶制备固定化脂肪 酶的方法,其特征在于所述的碱催化剂为氢氧化钠或氨水。
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