[发明专利]黑乳海参中具有抗肿瘤作用的总皂苷

说明书

技术领域

本发明涉及医药技术领域，是一种以黑乳海参为原料提取的总皂苷类化合物，含有该提取物的制备方法和用途。

背景技术

黑乳海参(Thelenota ananasJ)，又名“凤梨参”，为海洋棘皮动物门海参纲刺参科动物，其体形很大，长一般为700mm，宽约100mm，高约80mm，广泛分布于我国西沙群岛和台湾南端，具有补肝肾，益精，养血的功效。

皂苷是黑乳海参的主要次生代谢产物之一，是其化学防御的主要物质基础，具有抗真菌，抗凝血、免疫调节，细胞毒和抗病毒等各种生物活性。在体外细胞毒活性筛选中，发现黑乳海参的乙醇提取物具有强烈诱导稻瘟霉(Pyriculariaoryzae)菌丝体变形，最小变形浓度MMDC＝8μg/ml。

目前，关于黑乳海参的报道有：巫军、易杨华等，NobilisideA～C，Three NewTriterpene Glycosides from Sea Cucumber Holothuria nobilis Selenka，研究了黑乳海参体内的皂苷类化合物，通过从黑乳海参体内提取得到总皂苷，应用多种色谱技术对其进行分离纯化，根据化合物的理化性质和波谱数据鉴定其结构，结果分离得到了3个三萜皂苷类化合物，并将该化合物命名为Nobiliside A，B和C。该文献仅仅阐述了从黑乳海参体内的皂苷类化合物中分离纯化得到3个新的化合物，并对该化合物进行结构的鉴定，没有详细的提取物制备工艺；王远红，吕志华等，梅花参中多糖提取工艺及含量测定的研究，中国海洋大学学报，2005年第6期，公开了“采用正交设计L₉(3⁴)，研究梅花参(Thelenota ananas)中多糖的提取工艺，探讨并建立了测定海参多糖含量的方法”。结果表明：最佳提取条件为1g样品加40mL 3％KOH溶液，40～45℃超声2h；且提取温度为首要的影响因素；产物经二次乙醇纯化的结果较好，粗多糖得率20.25％。多糖经单糖组成分析，岩藻糖含量达到70％以上。测得梅花参中总糖含量8.79％；糖醛酸含量0.95％。

现有的文献主要是海参中多糖的提取工艺及含量测定的研究，关于总皂苷制备方法的研究很少。

发明内容

本发明的技术方案是提供一种黑乳海参总皂苷，本发明的另一技术方案是提供了该提取物的制备方法和用途。

黑乳海参总皂苷是由下述方法提取：原料黑乳海参，洗净，切碎，乙醇提取，提取液浓缩，通过大孔吸附树脂，依次用水和乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收溶剂至干，即得。

本发明还提供了该黑乳海参总皂苷的制备方法，它包括如下步骤：

a、干燥黑乳海参，加入85％～95％乙醇提取，提取液浓缩，提取液浓缩，得流浸膏；

b、将流浸膏溶于水中，通过大孔吸附树脂，依次用水和50％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收溶剂至干，即得。

本发明还提供了一种药物组合物，它是含有有效量的黑乳海参总皂苷为原料，加入药学上可接受的辅料或辅料性成分制备而成的制剂。

其中，所述的制剂是口服制剂、注射剂。黑乳海参总皂苷或黑乳海参总皂苷加上药用辅料组成的医学上可接受的各类制剂。如片剂、胶囊、颗粒、注射剂等。本发明所用的辅料为制药工程中常用的辅料如固体制剂所用的辅料：糊精、淀粉、淀粉衍生物、羧甲基纤维素、蔗糖、硫酸钙、硬脂酸镁、乳糖、微精纤维素、葡萄糖、山梨醇、甘露醇等。液体制剂所用的辅料如：水、乙醇、甘油、丙二醇、聚乙二醇等。

本发明提供了该药物组合物在制备抗肿瘤药物中的用途。

本发明黑乳海参总皂苷的生产工艺中，无需对产品进行脱脂，采用树脂吸附除杂，在生产工程中的处理量大，且能够经过活化重复使用，节约了成本，所涉及的有机溶剂只有乙醇，减少了有机溶剂对操作人员和生产管道的损害。本发明黑乳海参总皂苷与其它方式制备所得的提取物相比，成本低、药效显著，可控性强，质量稳定。

具体实施方式

实施例1

将黑乳海参10公斤克洗净，切碎，分别用5倍量(重量)的95％、85％、85％乙醇依次浸泡，每次浸泡7天，合并乙醇浸出液，减压回收乙醇，得流浸膏。将流浸膏溶于3倍量水中，过滤，滤液通过DA201-B大孔树脂柱，依次用水和50％乙醇洗脱，收集50％乙醇洗脱液，减压回收乙醇至干，得总皂苷55克。

实施例2

取黑乳海参总皂苷20g，用适量注射用水分散，加入辅料适量，混匀，制成颗粒，干燥。