[发明专利]北冬虫夏草的工厂化栽培方法无效
申请号: | 200810163601.9 | 申请日: | 2008-12-16 |
公开(公告)号: | CN101463325A | 公开(公告)日: | 2009-06-24 |
发明(设计)人: | 刘卿 | 申请(专利权)人: | 浙江博士园生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12R1/645 |
代理公司: | 温州瓯越专利代理有限公司 | 代理人: | 王阿宝 |
地址: | 323500浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 冬虫夏草 工厂 栽培 方法 | ||
1.一种北冬虫夏草的工厂化栽培方法,其特征在于包括以下步骤:
(1)、菌种制备:制备马铃薯葡萄糖琼脂培养基和改良马铃薯葡萄糖琼脂培养料备用;
①母种制备:从野生北冬虫夏草进行组织分离获得母种,母种在按1:20~1:25比例经过转管后,在18℃-23℃下培养13~15天,挑选长势较好的备用;
②原种制备:将马铃薯葡萄糖琼脂培养基或改良马铃薯葡萄糖琼脂培养基均匀装入培养瓶中,培养瓶的装料量为20%-40%,用棉塞封口,在0.1Mpa压力下灭菌1h,冷却后,在无菌条件下把备用的母种按1:1接入培养瓶中,静置24h后,放在摇床上培养至出现大量菌球,放置冰箱内4℃保存备用;
③栽培种制备:将马铃薯葡萄糖琼脂培养基或改良马铃薯葡萄糖琼脂培养基放入发酵罐中,对培养基和发酵罐管道分别在0.1Mpa压力下灭菌1h,冷却至20℃,在无菌条件下接入备用的原种,在20摄氏度下培养30-36h,至发酵罐内出现大量菌球;
(2)、配料装瓶:制作培养料,并将培养料均匀装入培养瓶中,培养瓶的装料量为20%-40%,用棉塞封口;
(3)、灭菌:把培养瓶放入灭菌锅中,在0.11Mpa-0.15Mpa压力下灭菌1.5h-2h;
(4)、接种:培养料冷却到24℃以下,在无菌条件下接种,每支母种接1瓶原种,每300ml原种接10L栽培种;
(5)、培养:将接种好的北冬虫夏草培养瓶移到发菌室静置培养24h后,置于摇床上进行振荡培养,140-160r/min,22-25℃,培养4-6天,然后再室内培养40天-60天,其中发菌室温度要求22℃~25℃,空气相对湿度65%~70%,且保持遮光,并适时开门窗进行通风换气,保持发菌室空气新鲜;
(6)、出草采收。
2.根据权利要求1所述的北冬虫夏草的工厂化栽培方法,其特征在于:所述的步骤(1)的马铃薯葡萄糖琼脂培养基的配比,每1000ml:马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂18~20g,其制备方法为将去皮马铃薯切片置容器内加水1000ml,煮沸15min,过滤,加入葡萄糖和琼脂,补足水至1000ml,加热溶解;琼脂溶解后,用分装器装入试管中,装量为试管长的1/5,塞上棉塞,置灭菌锅中,在0.1Mpa压力下灭菌0.5h,自然落磅;将试管趁热排放在斜面板上冷却。
3.根据权利要求1所述的北冬虫夏草的工厂化栽培方法,其特征在于:所述的步骤(1)的改良马铃薯葡萄糖琼脂培养基的配比,每1000ml:马铃薯200g、葡萄糖20g、磷酸二氢钾2g、硫酸镁1.5g,琼脂18~20g,其制备方法为将去皮马铃薯切片置容器内加水1000ml,煮沸15min,过滤,加入葡萄糖和琼脂,补足水至1000ml,加热溶解;琼脂溶解后,用分装器装入试管中,装量为试管长的1/5,塞上棉塞,置灭菌锅中,在0.1Mpa压力下灭菌0.5h,自然落磅;将试管趁热排放在斜面板上冷却。
4.根据权利要求1或2或3所述的北冬虫夏草的工厂化栽培方法,其特征在于:所述步骤(2)的培养料的配比为:玉米粉2%、葡萄糖2%、蛋白胨1%、酵母粉0.5%、KH2PO4 0.1%、MgSO4 0.05%,其PH值为6.5。
5.根据权利要求1或2或3所述的北冬虫夏草的工厂化栽培方法,其特征在于:所述步骤(2)的培养料的配比为:马铃薯20%玉米粉3%、葡萄糖2%、蛋白胨0.3%、、KH2PO4 0.15%、MgSO4 0.05%,其PH值为6.5。
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