[发明专利]用于重组AAV2/8病毒载体生产的重组I型单纯疱疹病毒及其用途无效
| 申请号： | 200810167070.0 | 申请日： | 2008-10-10 |
| 公开（公告）号： | CN101724608A | 公开（公告）日： | 2010-06-09 |
| 发明（设计）人： | 董小岩;吴小兵;肖啸 | 申请（专利权）人： | 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所;北京五加和分子医学研究所有限公司 |
| 主分类号： | C12N7/01 | 分类号： | C12N7/01;C12N15/41;C12N15/869;C12N5/10 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 100052 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 重组 aav2 病毒 载体 生产 单纯 疱疹病毒 及其 用途 | ||
1.本发明涉及生产重组腺伴随病毒rAAV2/8所需的复制和包装功能系统。本发明提供一种装载了2型腺相关病毒(AAV-2)rep和8型腺相关病毒cap基因(约4.3kb)的重组单纯疱疹病毒(rHSV1-rep2cap8)及其产生方法和其在重组腺伴随病毒rAAV2/8生产中的用途。本发明提出的能提供rAAV2/8复制和包装所需的全部功能的辅助病毒rHSV1-rep2cap8其特征在于，通过对一套含有HSV-1全基因组的粘粒(SetC)进行基因操作，将rep2cap8基因插入到在HSV-1基因组片段中，然后将其与其余4个粘粒共转染细胞，获得含有rep2cap8的重组HSV-1。该重组病毒既能作为在细胞中产生rAAV2/8所需要的辅助病毒功能，又能提供rep2cap8基因的功能，因此是一种在细胞中生产rAAV2/8的全功能辅助病毒。
2.依据权利要求1，本发明所述的rHSV1-rep2cap8，其特征在于rep2cap8基因分别插入在HSV-1 UL2基因(编码尿嘧啶DNA糖基化酶)和HSV-1 UL23基因(编码胸苷激酶基因)中，获得的重组病毒分别称为rHSV1-rep2cap8/ΔUL2和rHsV1-rep2cap8/ΔUL23。
3.依据权利要求1，本发明所述的rHSV1-rep2cap8病毒用于rAAV2/8病毒的生产。
4.依据权利要求1，本发明所述的rHSV1-rep2cap8病毒用于rAAV2/8病毒的生产的方法是用rHSV1-rep2cap8病毒感染携带了AAV2ITR及其间插入序列的载体细胞，包装产生rAAV2/8病毒。
5.依据权利要求4，所述的载体细胞是瞬时转染了AAV载体质粒的细胞。
6.依据权利要求4，所述的载体细胞是稳定转染了AAV载体质粒的细胞。
7.依据权利要求4，所述的载体细胞是瞬时转染了双链AAV载体质粒的细胞。
8.依据权利要求4，所述的载体细胞是稳定转染了双链AAV载体质粒的细胞。
9.依据权利要求4，所述的插入序列可包括了启动子、目的基因、polyA加尾信号等。
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