[发明专利]紫铆素及其衍生物在制备具有抑制黑色素瘤作用药物的用途

说明书

发明领域

本发明涉及一种化合物及其衍生物的新用途，具体来说，是紫铆素及其衍生物在制备治疗色素代谢疾病如白癜风和白发的药物的用途。

背景技术

白癜风是常见的一种局限性色素减退性皮肤病，发病率为0.5-2.0％，由于致病原因和发病机理目前尚未明确，国际上至今仍处于易诊难治的状况。该病被世界医学界列为疑难病症之一。目前白癜风的药物治疗方法有补骨脂素联合UVA治疗、皮质激素疗法、凯林联合UVA疗法、金属元素配合PUVA疗法、苯丙氨酸配合UVA疗法以及中药疗法。驱虫斑鸠菊为菊科植物驱虫斑鸠菊Vernoniaanthelmintica Willd的瘦果。于夏秋果实成熟时割取；或分别割取成熟果枝，打下果实，存于阴凉干燥处。原产于印度、巴基斯坦，中国新疆已有长约四百年的栽培历史。主要分布于新疆阿克苏地区。是新疆维吾尔民间治疗白癜风的药物，在70年代新疆药学研究人员将其制成医院制剂，应用于临床治疗白癜风，治愈率为7-20％，有效率大于90％，并且未见毒副作用。但是至今对驱虫斑鸠菊中的有效成分尚不清楚。为此，本发明人进行了进一步的筛选分离工作，发现了驱虫斑鸠菊治疗白癜风和白发等其他色素代谢疾病的化合物为紫铆素，从而完成了本发明。

发明目的

本发明的目的是提供紫铆素及其衍生物在制备治疗色素代谢疾病如白癜风和白发的药物的用途。

发明内容

本发明所述的紫铆素为3”-4’-7-三羟基二氢黄酮，结构式为：

紫铆素衍生物包括在5，6，7，8，3’，4’，5’，6’位被-OH取代的一组化合物及生成的相应糖苷类化合物；或被-OR或-R取代的一组化合物，其中R为C₁-C₈的烃基。

它可以从植物驱虫斑鸠菊种子或其他植物中提取获得，也可以通过化学合成获得。如果从驱虫斑鸠菊种子中提取获得，提取方法之一为：用甲醇加热回流，得到甲醇提取液，减压回收，浓缩，得到浓缩液，用乙酸乙酯和水分配，取乙酸乙酯层，将上清液通过硅胶柱层析，用氯仿-甲醇梯度洗脱，得到洗脱液，再在硅胶柱层析用石油醚-丙酮(4∶1-1∶1)洗脱，将洗脱液，再用葡聚糖凝胶LH20用50-80％甲醇洗脱，得到洗脱液，再用十八烷基键合硅胶层析，用50-100％甲醇洗脱，得到洗脱液，再用硅胶柱层析用氯仿-甲醇(10-25∶1)洗脱，得到。经过色谱分析证实为紫铆素。

我们进行药理实验证实，紫铆素可使黑色素细胞增殖，酪氨酸酶的活性提高，黑色素含量增高，可提高黑色素合成基因(酪氨酸酶基因.酪氨酸酶相关基因-1、酪氨酸酶相关基因-2)的表达，使黑色素小体类型发生明显变化，更趋向于色素颗粒的产生。因此，紫铆素可以治疗色素代谢疾病。紫铆素对细胞免疫、体液免疫具有抑制作用。通过对血清抗体、补体以及T淋巴细胞分泌IL-2活性分析，进一步在分子水平显示紫铆素对免疫系统具有抑制作用。紫铆素对黑色素瘤细胞系SKMel-19，SKMel-23，Mel-2A，MeWo，Bro.表现出了抑制作用。

附图简介

图1-----紫铆素及其衍生物在体外对黑色素含量的影响。

图2-----紫铆素在体外对黑色素细胞内酪氨酸酶活性的影响。

图3-----紫铆素在体外对黑色素细胞增殖的影响。

图4-----紫铆素在体外对黑色素合成基因表达影响。

图5-----紫铆素在体外对黑色素细胞中黑色素小体的影响。

图6-----紫铆素在对棕色豚鼠皮肤黑色素细胞的影响。

图7-----紫铆素在体外对小鼠脾淋巴细胞增殖反应的影响。

图8-----紫铆素在体外对小鼠脾细胞分泌IL-12活性的影响。

具体的实施方案

实验例1紫铆素的体外药效学研究

因白癜风患者皮损区的色素细胞及其功能受损，我们研究了紫铆素对体外培养的人体黑色素细胞的影响。

1.1.实验方案

1.1.1筛选模型：正常人黑色素细胞；

1.1.2.来源：儿童包皮环切手术的多余包皮，无感染。

1.1.3.培养条件：取正常儿童包皮胰酶消化后获得黑色素细胞，在DMEM培养基中添加bFGF，CT，TPA，FCS，双抗等各种因子，5％CO₂，37℃条件下培养7天后进行传代，传代细胞在上述条件下培养48小时后加入不同浓度的药物和对照，测定相关分析指标。