[发明专利]以新的代谢途径方式由可再生的原材料通过发酵获得丙酮

权利要求书

1.由乙酰辅酶A起始制备丙酮的方法，该方法包括下述步骤：

A.由酮硫解酶催化的由乙酰辅酶A酶促转化为乙酰乙酰辅酶 A；

B.由乙酰乙酰辅酶A酶促转化为乙酰乙酸和辅酶A

C.由乙酰乙酸脱羧酶催化的由乙酰乙酸脱羧产生丙酮和CO₂， 或自发发生的，

其特征在于

在步骤B中，辅酶A不转移到受体分子中以及

步骤B中的酶促转化是由具有乙酰乙酸辅酶A水解酶活性、且 氨基酸序列为SEQIDNo.1、3或5的多肽催化的。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，

步骤A中的酶促转化是由具有酮硫解酶活性、且氨基酸序列为 SEQIDNo.16的多肽催化的。

3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，

步骤C中的转化是由具有乙酰乙酸脱羧酶活性、且氨基酸序列 为SEQIDNo.18的多肽催化的。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，

步骤C中的所述转化是自发发生的。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，

步骤B中的酶促转化是由具有乙酰乙酸辅酶A水解酶活性、且 氨基酸序列为SEQIDNo.1的多肽催化的。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，

步骤B中的酶促转化是由具有乙酰乙酸辅酶A水解酶活性、且 氨基酸序列为SEQIDNo.3的多肽催化的。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，

步骤B中的酶促转化是由具有乙酰乙酸辅酶A水解酶活性、且 氨基酸序列为SEQIDNo.5的多肽催化的。

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法是通过微生 物进行的。

9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，

所述的微生物至少包含：

a核酸，其编码权利要求2中所述的至少一个多肽，和

b核酸，其编码权利要求5-7中所述的至少一个多肽，和

c核酸，其编码权利要求3中所述的至少一个多肽，

使用核酸a，b和c以保证所述多肽在所述微生物中表达。

10.权利要求9所述的方法，其特征在于，

所述核酸a选自：

序列17或其互补链所描述的DNA序列。

11.如权利要求9或10所述的方法，其特征在于，

所述的核酸c选自：

序列19或其互补链所描述的DNA序列。

12.如权利要求9所述的方法，其特征在于，

所述的核酸b选自：

序列2或其互补链所描述的DNA序列。

13.如权利要求9所述的方法，其特征在于，

所述的核酸b选自：

序列4或其互补链所描述的DNA序列。

14.如权利要求9所述的方法，其特征在于，

所述的核酸b选自：

序列6或其互补链所描述的DNA序列。

15.如权利要求9所述的方法，其中，核酸a，b和c位于一条 核苷酸链上，且其后者选自：

具有如SEQIDNo.7所示的核酸序列的质粒pSKatt，

具有如SEQIDNo.8所示的核酸序列的质粒pKSatt，

具有如SEQIDNo.9所示的核酸序列的质粒pUC19att，

具有如SEQIDNo.10所示的核酸序列的质粒pUC18att，

和

具有如SEQIDNo.11所示的核酸序列的质粒pUC19ayt。