[发明专利]应用聚乙二醇修饰基因工程蛋白质的方法无效

专利信息
申请号: 200810174166.X 申请日: 2008-11-05
公开(公告)号: CN101434640A 公开(公告)日: 2009-05-20
发明(设计)人: 梁国栋;张明杰;李圭哲;陈海宁;符启骄;周湘龙 申请(专利权)人: 海南海梁生物高科技有限公司
主分类号: C07K1/107 分类号: C07K1/107;C07K1/18
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 570216海南省海*** 国省代码: 海南;66
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摘要:
搜索关键词: 应用 聚乙二醇 修饰 基因工程 蛋白质 方法
【权利要求书】:

1、应用聚乙二醇修饰基因工程蛋白质的方法,将浓度1~8毫克/毫升的蛋白质溶液加入装有填料的容器中,搅拌1~4小时,搅拌速度为20~200转/分钟,使蛋白质均匀地吸附在填料上;然后将吸附蛋白质的填料滤干,加入浓度为相对蛋白质浓度的3~7倍摩尔比活性高分子聚合物溶液中,搅拌1~12小时,反应温度为4℃~23℃,搅拌速度为20~200转/分钟,使活性聚乙二醇与蛋白质共价结合;然后将填料装柱、用缓冲液梯度洗脱分离,并收集单PEG修饰的蛋白质。

2、根据权利要求1所说的应用聚乙二醇修饰基因工程蛋白质的方法,所述的柱填料是层析柱的填料。

3、根据权利要求1所说的应用聚乙二醇修饰基因工程蛋白质的方法,所述的柱填料是离子层析柱填料、疏水柱填料、亲和层析柱填料之一。

4、根据权利要求1所说的应用聚乙二醇修饰基因工程蛋白质的方法,所述的活性高分子聚合物是聚乙二醇,葡聚糖,聚乙烯,聚丙烯,聚乙烯醇,糖类聚合物及其衍生物之一。分子量在3000~40000道尔顿范围内。

5、根据权利要求1所说的应用聚乙二醇修饰基因工程蛋白质的方法,所述的的蛋白质是α-、β-、γ-干扰素之一。

6、根据权利要求5所说的应用聚乙二醇修饰基因工程蛋白质的方法,所述的填料为阳离子层析柱填料;所述的缓冲液的PH值为1.0~7.0的醋酸盐缓冲液、三乙胺缓冲液、枸橼酸缓冲液之一。

7、根据权利要求1所说的应用聚乙二醇修饰基因工程蛋白质的方法,所述的的蛋白质是集落形成因子。

8、根据权利要求7所说的应用聚乙二醇修饰基因工程蛋白质的方法,所述的的蛋白质是G-CSF、GM-CSF、EPO之一。

9、根据权利要求1或8所说的应用聚乙二醇修饰基因工程蛋白质的方法,所述的填料为阴离子层析柱填料;所述的缓冲液的PH值为7.0~11.0的磷酸盐缓冲液、三羟甲基氨基甲烷缓冲液之一。

10、根据权利要求1所说的应用聚乙二醇修饰基因工程蛋白质的方法,所述的蛋白质是抗体、多肽或链激酶。

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