[发明专利]应用聚乙二醇修饰基因工程蛋白质的方法无效
申请号: | 200810174166.X | 申请日: | 2008-11-05 |
公开(公告)号: | CN101434640A | 公开(公告)日: | 2009-05-20 |
发明(设计)人: | 梁国栋;张明杰;李圭哲;陈海宁;符启骄;周湘龙 | 申请(专利权)人: | 海南海梁生物高科技有限公司 |
主分类号: | C07K1/107 | 分类号: | C07K1/107;C07K1/18 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 570216海南省海*** | 国省代码: | 海南;66 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 应用 聚乙二醇 修饰 基因工程 蛋白质 方法 | ||
1、应用聚乙二醇修饰基因工程蛋白质的方法,将浓度1~8毫克/毫升的蛋白质溶液加入装有填料的容器中,搅拌1~4小时,搅拌速度为20~200转/分钟,使蛋白质均匀地吸附在填料上;然后将吸附蛋白质的填料滤干,加入浓度为相对蛋白质浓度的3~7倍摩尔比活性高分子聚合物溶液中,搅拌1~12小时,反应温度为4℃~23℃,搅拌速度为20~200转/分钟,使活性聚乙二醇与蛋白质共价结合;然后将填料装柱、用缓冲液梯度洗脱分离,并收集单PEG修饰的蛋白质。
2、根据权利要求1所说的应用聚乙二醇修饰基因工程蛋白质的方法,所述的柱填料是层析柱的填料。
3、根据权利要求1所说的应用聚乙二醇修饰基因工程蛋白质的方法,所述的柱填料是离子层析柱填料、疏水柱填料、亲和层析柱填料之一。
4、根据权利要求1所说的应用聚乙二醇修饰基因工程蛋白质的方法,所述的活性高分子聚合物是聚乙二醇,葡聚糖,聚乙烯,聚丙烯,聚乙烯醇,糖类聚合物及其衍生物之一。分子量在3000~40000道尔顿范围内。
5、根据权利要求1所说的应用聚乙二醇修饰基因工程蛋白质的方法,所述的的蛋白质是α-、β-、γ-干扰素之一。
6、根据权利要求5所说的应用聚乙二醇修饰基因工程蛋白质的方法,所述的填料为阳离子层析柱填料;所述的缓冲液的PH值为1.0~7.0的醋酸盐缓冲液、三乙胺缓冲液、枸橼酸缓冲液之一。
7、根据权利要求1所说的应用聚乙二醇修饰基因工程蛋白质的方法,所述的的蛋白质是集落形成因子。
8、根据权利要求7所说的应用聚乙二醇修饰基因工程蛋白质的方法,所述的的蛋白质是G-CSF、GM-CSF、EPO之一。
9、根据权利要求1或8所说的应用聚乙二醇修饰基因工程蛋白质的方法,所述的填料为阴离子层析柱填料;所述的缓冲液的PH值为7.0~11.0的磷酸盐缓冲液、三羟甲基氨基甲烷缓冲液之一。
10、根据权利要求1所说的应用聚乙二醇修饰基因工程蛋白质的方法,所述的蛋白质是抗体、多肽或链激酶。
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