[发明专利]富硒乳酸粪肠球菌三层微胶囊及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种富硒乳酸粪肠球菌三层微胶囊，由内到外依次包括富硒乳酸粪肠球菌、营养层、抗酸绝氧层和抗压防碎层，其特征在于所述营养层为灭菌脱脂牛乳，所述抗酸绝氧层为κ-卡拉胶和刺槐豆胶，所述抗压防碎层为天然高分子胶体，所述天然高分子胶体为明胶和海藻酸钠的混合物。

2.一种制备权利要求1所述的富硒乳酸粪肠球菌三层微胶囊的方法，包括富硒乳酸粪肠球菌的培养和富硒乳酸粪肠球菌三层微胶囊包埋，其特征在于其中所述富硒乳酸粪肠球菌的培养条件为：在乳酸粪肠球菌的常用发酵液或培养基中，采用抽气换气厌氧罐发酵，硒添加量25～35mg/L、接种量5～15g/L、发酵时间28～32h、pH值4.5～6.3；其中所述富硒乳酸粪肠球菌三层微胶囊包埋包括以下步骤：

I层包埋：即营养层的包埋，将富硒乳酸粪肠球菌与灭菌脱脂牛乳混合，制成40％～60％(w/v)菌体脱脂牛乳混悬液，喷淋在pH4的无菌盐酸水溶液中，形成脱脂牛乳包埋的菌体颗粒；

II层包埋：即抗酸绝氧层的包埋，将0.02％～0.03％(w/v)κ-卡拉胶水溶液和0.20％～0.25％(w/v)刺槐豆胶水溶液等体积混合，加入I层包埋的菌体颗粒，制成40％～60％(w/v)菌体胶体混悬液，喷淋在8℃～10℃无菌冷水中形成包埋小颗粒；

III层包埋：即抗压防碎层的包埋，把II层包埋的小颗粒与天然高分子胶体水溶液混合，制成50％～70％(w/v)菌体胶体混悬液，采用喷雾干燥的低温改进方法，得到三层微胶囊成品。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述富硒乳酸粪肠球菌的培养条件为：所述发酵液为蛋白胨10.0g，牛肉膏10.0g，酵母提取物5.0g，葡萄糖20.0g，K₂HPO₄2.0g，吐温801ml，柠檬酸三铵2.0g，乙酸钠5.0g，MgSO₄·7H₂O0.58g，MnSO₄·4H₂O 0.25g，蒸馏水1L；采用抽气换气厌氧罐发酵，硒添加量35mg/L、接种量10g/L、发酵时间28h、pH值4.5～6.3。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述III层包埋中所述天然高分子胶体水溶液为明胶水溶液和海藻酸钠水溶液的混合溶液。

5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述III层包埋中所述天然高分子胶体水溶液为浓度2.0％～2.5％(w/v)的明胶水溶液与0.1％～0.3％(w/v)的海藻酸钠水溶液的任意比例混合溶液，在所述浓度范围内高浓度明胶水溶液与低浓度海藻酸钠水溶液或高浓度海藻酸钠水溶液与低浓度明胶水溶液进行相互混合搭配。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于所述天然高分子胶体水溶液为浓度为2.5％(w/v)的明胶水溶液和0.1％(w/v)的海藻酸钠水溶液的等体积混合溶液，并且经115℃灭菌15min。

7.根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述喷雾干燥采用任意喷雾干燥机，干燥进风温度95℃～105℃，进样量180L/h～360L/h，出口温度50℃～55℃。

8.权利要求1所述的富硒乳酸粪肠球菌三层微胶囊的应用，将其作为添加剂加入动物饲料中饲喂或作为动物保健产品直接单独饲喂。