[发明专利]一种苦参素冻干粉制剂及其制备和检测方法

说明书

技术领域

本发明属于中药领域，具体涉及一种苦参素冻干粉制剂及其制备和检测方法。 

背景技术

苦参为多年生草本或灌木，别名苦骨、川参、凤凰爪、牛参。苦以味名，参以功名，故名苦参，春、秋二季采挖。苦参的药用部位主要为根部，其中含有的生物碱主要为苦参碱、氧化苦参碱，其药用价值早在中国第一部药物学著作《神农本草经》中就有记载。据《本草纲目》记载：苦参，苦，寒，无毒，具有清热解毒、祛风燥湿、补中明目、养肝胆气等功效。苦豆子始载于《神农本草经》，别名苦豆根、苦甘草、苦豆草等，属豆科植物槐属，以全草、根、种子入药。全草夏季采，根春秋采，种子秋季采，晒干或鲜用，含苦参碱、槐果碱、槐定碱、苦豆碱等生物碱。苦参素是一类含有苦参次碱15酮基本结构的化合物，主要从苦参根及苦豆子中提取，包括氧化苦参碱与少量氧化槐果碱两种成分，其中98％以上为氧化苦参碱。 

研究发现，苦参素能抑制乙型肝炎病毒的复制，具有一定的HBeAg阴转率。同时可以抑制胶原活动度，防止肝纤维化，还具有阻断肝细胞凋亡、稳定细胞膜、清除自由基及免疫调控等作用。在治疗慢性乙型肝炎的众多药物中，苦参素作为一种纯天然生物碱类药物，由于不良反应少，价格低廉而深受欢迎。市场上现有苦参素药品的制剂形式有胶囊剂、片剂、注射液、粉针剂等。其中苦参素粉针剂相对注射液来说，质量较为稳定可靠，且易于运输、储存，因此更具市场吸引力。 

国内市场上已经有多家企业推出了苦参素冻干粉制剂，虽然其稳 定性较注射液有所改善，但还未达到理想状态。目前市场上的产品有效期一般为12～18个月，且在有效期内制剂即发生显著变化，颜色变深，有关物质的含量显著增加，达不到标准要求，给制剂安全性带来隐患。因此，需要对现有苦参素冻干粉制剂的制备工艺进行改进，以提高制剂的稳定性，延长保质期，保障用药安全。 

另外，为了获得性能良好的苦参素冻干粉产品，制备过程中需采用可靠稳定的测试方法对其有效成分的含量进行精确检测。国家标准中苦参素注射剂的含量测定方法为化学滴定法测定总生物碱含量，但该法操作费时、繁琐、专属性不强。目前可以采用的相对精确、快速的方法是高效液相色谱法。但由于苦参素为氧化苦参碱与极少量氧化槐果碱的混合碱，在检测过程中该方法容易遇到的问题是，谱图的峰形不好，分离度达不到要求，主成分峰与杂质峰分离不开，拖尾严重，从而影响含量测定的准确性。为了强化苦参素冻干粉制剂产品的质量控制，需要对检测条件进行优化，建立一种专属性更强且更为简便可靠的高效液相色谱方法。 

发明内容

本发明的目的之一是提供一种稳定性更高的苦参素冻干粉制剂，其中的主要成分为苦参素、甘露醇和依地酸二钠，它们之间的重量比为：苦参素∶甘露醇∶依地酸二钠＝100∶100∶0.05～0.5；优选的比例为100∶100∶0.1～0.3。其中，所述依地酸二钠也可以用依地酸钙钠代替。本发明的苦参素冻干粉制剂有效期可增至24个月，且在效期范围内，制剂溶液颜色浅，氧化苦参碱含量稳定，有关物质含量无明显增加。 

本发明的另一目的是提供一种检测苦参素冻干粉制剂产品中苦参素含量的方法。其中使用高效液相色谱法作为检测方法，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以磷酸盐缓冲液(0.025mol/LNa₂HPO₄-0.025mol/L NaH₂PO₄，pH值3.5)-乙腈(90∶10)为流动相，流速为1.0ml/min，检测波长为220nm，柱温为室温。本发明的检测 方法与传统检测方法相比，能够较好地分离主成分峰与杂质峰，含量测定更加准确。 

具体实施方式

以下实施例用于详细说明而不是限制本发明。在下面的描述中，乙醇溶液的浓度为体积百分数，除另有说明外，其他份数和百分数均按重量计算。 

实施例1 

称取苦参粗粉100g，用10倍量60％乙醇溶液浸泡24h后，以5ml/min的流速进行渗漉。渗漉液减压浓缩后用适量纯化水溶解，过滤，上AB-8大孔吸附树脂，用70％乙醇溶液洗脱，洗脱液回收乙醇后加双氧水进行氧化，至氧化完全，加入还原剂还原过量的双氧水，蒸干溶液，用丙酮结晶，重结晶，得白色苦参素结晶。 

经检测，苦参素中含氧化苦参碱(C₁₅H₂₄N₂O₂)99.6％。 

实施例2 

处方组成筛选试验