[发明专利]一种抗肺癌A549细胞增殖的中药多糖提取物及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及中药技术领域，具体地说是涉及一种抗肺癌A549细胞增殖的中药多糖提取物及其制备方法。

背景技术

肺癌(lung cancer)原发于支气管黏膜和肺泡上皮细胞，是当今全球常见恶性肿瘤之一，近年来已居恶性肿瘤之首，特别是随着人口老龄化，城市人口比例逐年升高，城镇工业生产迅速发展，环境污染进一步恶化，吸烟等不良习惯相当普遍等原因，其发病率在我国呈上升趋势^[1，2]。据世界卫生组织(WHO)预测，到2025年，我国每年新增的肺癌病死例数将超过100万，患病人数将居世界之首^[3]。

治疗包括肺癌在内的肿瘤一直是临床医学研究和新药开发的热点，但是传统的放化疗由于缺乏特异性，取得疗效的同时往往给患者带来较大的毒副反应，而中药(包括单味药和中药复方)在这方面已崭露头角，并迅速发挥重要作用，具有广阔的开发前景。

发明内容

针对肺癌高发病率及西医西药治疗局限性的现状，本发明的目的在于提供一种抗肺癌A549细胞增殖的中药多糖提取物及制备方法。

本发明的目的是通过以下的技术方案来实现的：

1.处方

一种抗肺癌A549细胞增殖的中药多糖提取物，其特征在于它是由下列重量配比的原料药所制成：

猫爪草5～15g、金荞麦5～15g、鱼腥草5～15g、仙鹤草5～15g、冬瓜子5～15g、山茨菇10～20g、苏木10～20g、红花10～20g、法半夏10～20g、胆南星5～15g、沙参5～15g、玉竹5～15g、麦冬5～15g。

制备上述中药多糖提取物的方法，步骤如下：

1)将处方药13味加水煎煮，过滤收集提取液，经浓缩得提取液I；

2)取提取液I加乙醇溶液混匀，静置离心，取沉淀水溶醇沉纯化，得沉淀为多糖粗提取物II；

3)取多糖粗提取物II用水加热溶解，用等量的氯仿-正丁醇萃取，剧烈振摇，静置分层后，离心去除水层与有机层中间的凝胶物，如此反复直到凝胶物除尽为止，将上层水液浓缩、干燥，得多糖提取物III。

上述步骤1)中加水的水量为药材量的10～15倍，水煎煮0.5～1小时，提取溶液浓缩至0.5g生药/ml。

上述步骤2)中加70～90％的乙醇溶液，加的量为提取液I的2～3倍，静置10～12小时后离心，取沉淀反复3～4次水溶醇沉纯化。

上述步骤3)中所述的氯仿-正丁醇以5:1比例进行萃取，剧烈振摇15～20分钟，将上层水液浓缩至10g生药/ml，60℃真空干燥。

上述中药多糖提取物在制备治疗肺癌药物中的应用。

1.1 处方来源

肺为娇脏，主气，司呼吸，其气宜宣宜降。肺在病理状态下常为＂贮痰之器＂。肺癌患者的临床主要表现为咳嗽、咯痰，痰多或少，痰色或白或黄或灰黑，痰质或清稀如水、或粘稠浊腻，或痰中夹血，气急，胸闷，胸痛。西医学诊断通过CT、MRI、支气管镜、脱落细胞检查等发现肺部实质性占位病变及恶性细胞。

周仲瑛教授为中国著名中医，博士生导师，政府津贴专家，已业医六十余年，医德高尚，技艺精湛，治愈急疑难杂症患者难计其数。近年来，随着肿瘤发病率的增高，肺癌患者急骤增多。周老师结合肺的生理病理特点，经过数十年的临床观察与治疗，认为肺癌的关键癌毒因素在于痰浊、瘀血、气逆；肺之气阴两虚是肺癌发生、复发，转移的关键。因此确立治则为祛邪治标实，固本培正虚。治法重在化痰泄浊，活血祛瘀、行气降逆以及益气养阴。根据病患病期之不同，病理因素的重点而随证治疗。多选用冬瓜子、法夏、胆南星(燥湿化痰)；山茨菇、猫爪草、金荞麦、鱼腥草(软坚散结)，仙鹤草、苏木、红花(活血化瘀)；沙参、玉竹、麦冬(益气养阴)等药物。该抗肺癌有效经验方又名周氏克金岩方(下简称克金岩方)，通过大量临床研究，肺癌的中医治疗在改善患者临床症状，防止复发，稳定瘤体，提高生活质量等方面均有良好的作用，成为肿瘤综合治疗手段中必不可少的组成部分。

1.2.药效学研究

1.2.1 处方提取物制备

取冬瓜子10g、法半夏12g、胆南星10g、山茨菇12g、猫爪草10g、金荞麦10g、鱼腥草10g，仙鹤草15g、苏木12g、红花15g、沙参10g、玉竹10g、麦冬10g，加15倍量水煎煮0.5小时，过滤收集提取液，浓缩得全方提取液I(0.5g生药/ml)。

1.2.2 细胞来源

人肺癌A549细胞由南京大学生命科学院惠赠。

1.2.3 A549细胞的增殖抑制作用