[发明专利]红景天苷及其杂质的分离方法和红景天苷及其杂质的RP－HPLC分析法

权利要求书

1.一种分离红景天苷原料药中红景天苷和三个杂质的方法，所述的三个杂质分别为：对羟乙基苯基-4-氧-β-D-葡萄糖苷、对羟苯乙酰氧基-β-D-吡喃葡萄糖苷和对乙酰基苯基-4’-氧-β-D-葡萄糖苷，其特征是它由下列步骤组成：

步骤1.用硅胶柱色谱分离

步骤1.1.拌样：称取100目硅胶倒入蒸发皿中，再倒入含量97％的红景天苷的甲醇饱和溶液以正好覆盖为宜，搅拌均匀蒸去大部分甲醇，在60℃的真空干燥箱中干燥至恒重，

步骤1.2.装柱：将200-300目硅胶225g用氯仿湿法装柱，平衡，

步骤1.3.上样：取拌样硅胶，加于色谱柱顶端，

步骤1.4.洗脱：氯仿∶甲醇梯度洗脱，流速为3-4滴/秒，分4段收集，

步骤2.用半制备型高效液相色谱分离纯化红景天苷及其杂质，其中半制备型高效液相色谱条件为：

色谱柱：ODS C₁₈，5μm，250×10.0mm内径，

流动相组成体积比：甲醇∶水＝11∶89，

流速：3.0mL/min，

柱温：25℃，

检测波长：UV 275nm，

进样量：50μL，

分段收集流出液，HPLC跟踪检测。

2.一种红景天苷及其杂质的高效液相色谱定量分析法，所述的杂质为：对羟乙基苯基-4-氧-β-D-葡萄糖苷、对羟苯乙酰氧基-β-D-吡喃葡萄糖苷和对乙酰基苯基-4’-氧-β-D-葡萄糖苷，其特征是采用反相高效液相色谱法，高效液相色谱条件为：

色谱柱：ODS C₁₈，5μm，150×4.6mm内径，

流动相组成体积比：甲醇∶水＝15∶85，

流速：1.0mL/min，

柱温：25℃，

检测波长：UV 275nm，

进样量：20μL。