[发明专利]红活麻提取物及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及中药，特别涉及中药材提取物，尤其是具有镇痛、抗炎和免疫抑制作用的中药材提取物。

背景技术

红活麻是分布于湖北恩施自治州、宜昌、神农架、襄樊等地，主要来源于荨麻科植物珠芽艾麻Laportea bulbifera(Sieb.et Zucc.)Wedd.的干燥根，其干燥茎皮与叶、珠芽亦可药用。红活麻性味辛、苦、温，具有祛风除湿，利水消肿，活血止痛之功效。当地采摘晾晒煮水入药，治疗风湿关节痛、跌打损伤、营养不良性水肿，效果显著。因药材资源分布的局限，目前对它的研究甚微，且仅局限在生药鉴定方面，对其药理作用及物质基础的研究国内外均未涉及。

对于自身免疫病，目前在国内外除糖皮质激素及毒性较大的免疫抑制药如CsA和FK506等外，并无较为有效的治疗药物。因此，在我国资源丰富的中药材中寻找类似糖皮质激素作用的抗炎免疫抑制药是中药现代化的主要方向。

发明内容

本发明的任务是采用活性导向分离提取红活麻有效部位，观察其镇痛、抗炎和免疫抑制作用，试图寻找和发现其活性部位和作用，旨在提供新的具有镇痛、抗炎和免疫抑制作用有效提取物和药物制剂，即提供类似糖皮质激素作用的抗炎免疫抑制药物。

实现本发明的技术方案是：

本发明提供的红活麻提取物是按以下方法制备的提取物：

a.将红活麻洗净晾干，切断或捣碎，用95％医用酒精浸泡，使没过药材，每次泡三天，连续泡五次，混合浸泡液，蒸馏回收酒精，得乙醇浓缩液；

b.将所得乙醇浓缩液用蒸馏水混匀后用分析纯石油醚萃取，每次萃取体积比为浓缩液与石油醚1∶3，混匀后静置分层，分离石油醚层，重复上述萃取操作若干次，至石油醚层的颜色基本为无色，混合萃取液，蒸馏回收溶剂，得石油醚部位膏质和残留浓缩液；

c.将步骤b所得残留浓缩液用分析纯乙酸乙酯萃取，每次萃取体积比为：残留浓缩液体直至萃取液基本为无色，混合萃取液，蒸馏回收溶剂，得红活麻乙酸乙酯部位膏质，即本发明红活麻提取物。

本发明提供的红活麻提取物可用于制备具有镇痛、抗炎和/或免疫抑制作用的药物，即以红活麻提取物为活性成分，按常规方法制备成药剂，如乳剂、胶囊剂等。

本发明实验资料

一、材料与方法

(一)材料

1.药材红活麻于11月采摘于湖北恩施鹤峰县晒坪，经同济医学院药学院中药系生药学专家鉴定，其根部入药。

2.主要试剂和仪器95％医用酒精(湖北省武汉市惠昌物资贸易公司封装)、石油醚(沸程60-90℃)、乙酸乙酯、正丁醇(以上三种试剂均由天津市化学试剂三厂生产)，二甲苯、冰醋酸，化学试剂均为分析纯；磷酸盐缓冲液(PBS)、NH₄CL红细胞裂解液、RPMI-1640完全培养液(GIBCO公司，美国)、刀豆蛋白(ConA)(sigma公司)、四甲基偶氮唑盐(MTT)(Amresco公司，美国)、胎牛血清(FCS)(杭州四季青公司)；IL-4和INF-γ试剂盒(R&D公司)；IL-2盒IL-10试剂盒(eBioScience公司)；环胞霉素(CsA)(山东新华制药股份有限公司)。旋转蒸发仪、YLS-6A智能热板仪、SW-CJ-2FD型双人单面净化工作台(苏州净化设备有限公司)、高速冷冻离心机(HERMLE，德国)、XDS-1B倒置显微镜(重庆光电仪器有限公司)、二氧化碳培养箱(Napco，法国)

3.动物昆明种小鼠(由华中科技大学同济医学院实验动物中心提供)雌雄兼用。

(二)方法

1.药材提取，药物制备：

取湖北恩施产红活麻6kg，把药材晾干后剪碎，用95％医用酒精浸泡，使没过药材，每次泡三天，连续泡五次，混合浸泡液，蒸馏回收酒精，得乙醇浓缩液1311ml，用蒸馏水混匀后依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，混合萃取液，所用试剂均为分析纯，蒸馏回收各种溶剂，得到以下不同部位浸膏：水部位10.54g；正丁醇部位4.15g；乙酸乙酯部位8.96g；石油醚部位9.60g。

每个部位各取500mg，用5mlNS溶解配成高浓度溶液或悬液。

从上述高浓度溶液中取出2ml加入2mlNS，配成低浓度溶液(或悬液)。