[发明专利]创伤弧菌基因快速诊断试剂盒及其检测方法有效
| 申请号： | 200810198808.X | 申请日： | 2008-09-26 |
| 公开（公告）号： | CN101403004A | 公开（公告）日： | 2009-04-08 |
| 发明（设计）人： | 曹以诚;李志勇;杜正平;陈洵;谭惠媚;易敏英 | 申请（专利权）人： | 广州华峰生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 广州粤高专利代理有限公司 | 代理人： | 陈 卫 |
| 地址： | 510663广东省广州市经济技*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 创伤 弧菌 基因 快速 诊断 试剂盒 及其 检测 方法 | ||
1.一种创伤弧菌基因快速诊断试剂盒，其特征在于由Bst DNA聚合酶、反应液、稳定液、样品预处理液、显色液和阳性对照液组成，以上五种液体分别置于容器中，
反应液内两对引物为：
外引物F3：TGAGAACGGTGACAAAACGG；
外引物B3：GAGCTTATCGCCTTCCCAAT；
内引物FIP：AGGCCCCAAACTTGGTTCCAATTTTTTGCGGGTGGTTCGGTTA；
内引物BIP：AGCCGAGTRGCATCCGATCGTTTTGCTAAGTTCGCACCACACT；
每1L反应液中含有1.6～2mmol dNTP、20～25mmol Tris-HCl、10～12.5mmol氯化钾、10～12.5mmol硫酸铵、8～10mmol硫酸镁、1～1.25ml TritonX-100、0.8～1mol甜菜碱、内引物FIP/BIP各1.6～2mol和外引物F3/B3各0.2～0.25mol；
每1L样品预处理液中含有10～20mmol pH 8.0的Tris-HCl、1～2mmol EDTA和10～12ml Triton X-100；
上述阳性对照为创伤弧菌基因组DNA。
2.根据权利要求1所述试剂盒，其特征在于所述的显色液为SYBRGreen I或EvaGreen。
3.根据权利要求1所述试剂盒，其特征在于所述每1L样品预处理液中含有20mmol pH 8.0的Tris-HCl、2mmol EDTA和12ml TritonX-100。
4.根据权利要求1所述试剂盒，其特征在于所述每1L反应液中含有2mmol dNTP、25mmol Tns-HCl、12.5mmol氯化钾、12.5mmol硫酸铵、10mmol硫酸镁、1.25ml TritonX-100、1mol甜菜碱、内引物FIP/BIP各2mol和外引物F3/B3各0.25mol。
5.根据权利要求1所述试剂盒，其特征在于所述稳定液为石蜡油。
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