[发明专利]血液中6-巯基嘌呤的电化学检测方法及其装置

说明书

技术领域

本发明涉及电化学分析技术领域，具体涉及一种血液中6-巯基嘌呤的电化学检测方法及其装置。

背景技术

6-巯基嘌呤(6-MP)是一种嘌呤类衍生物，临床上主要用于治疗急性白血病和绒毛膜上皮癌。口服6-巯基嘌呤经过胃肠和肝的吸收量相当低，静脉注射6-巯基嘌呤，虽然提高了血液中6-巯基嘌呤的浓度，但其在血液中的半衰期较短，甚至发生快速衰减。也就是说，无论是口服还是静脉注射，血液中6-巯基嘌呤浓度变化不稳定，而且个体间的差异非常大，因此临床上通常依据病人体重来用药显然没有个体针对性。为此，高效液相色谱法、毛细管电泳法、毛细管电泳-激光诱导荧光和液相色谱法-电化学检测法都被发展于6-巯基嘌呤的检测，但由于这些方法存在仪器价格昂贵、操作繁琐和程序复杂等不足，目前十分希望能发展一种简便有效的方法，以实现不同个体血液中6-巯基嘌呤的实时跟踪检测，这对个体间6-巯基嘌呤的准确药剂量、治疗效果的提高和减小药物毒副作用显得相当重要。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种操作简单，试剂耗量少，且可实现对血液中6-巯基嘌呤进行实时监控的电化学检测方法。

本发明的另一个目的在于提供实现上述电化学检测方法的装置。

本发明的上述目的是通过如下方案予以实现的：

一种血液中6-巯基嘌呤的电化学检测方法，其具体步骤如下：

(1)制备含有血液和6-巯基嘌呤的检测溶液，将该检测溶液加入电解池中；

(2)制备标记物/多壁碳纳米管修饰石墨电极；

(3)将上述石墨电极置入装有上述检测溶液的电解池中，对血液中6-巯基嘌呤进行检测。

上述步骤(1)中，制备含有血液和6-巯基嘌呤的检测溶液时，采用的溶液为pH＝7.2的三羟甲基氨基甲烷/氯化钠缓冲溶液。

上述步骤(2)中，标记物为多吡啶钴配合物，如三氯化三邻菲咯啉合钴，三氯化三邻菲咯啉合钴的配位阳离子结构式如(I)所示：

上述步骤(3)中，标记物/多壁碳纳米管修饰石墨电极对血液中6-巯基嘌呤的检测采用的方法可以为任意一种电化学检测方法，如微分脉冲伏安法。

在上述血液中6-巯基嘌呤的电化学检测方法中，所用的工作电极为石墨电极，对电极为钛电极，参比电极为银/氯化银电极(0.05摩尔/升氯化钠)。制作及检测过程如下：第一步，先制备含不同浓度6-巯基嘌呤的三羟甲基氨基甲烷/氯化钠缓冲溶液(pH＝7.2)，然后按1：1200至1：400的体积比配制血液与含6-巯基嘌呤缓冲溶液的混合液，并移取0.35毫升上述含6-巯基嘌呤缓冲液或混合液于检测池中；第二步，制备标记物/多壁碳纳米管修饰石墨电极；第三步，将上述石墨电极置入装有上述检测溶液的电解池中，进行微分脉冲伏安法检测(也可采用别的电化学检测方法)；第四步，根据标记物或标记物与6-巯基嘌呤作用产物的还原峰电流与6-巯基嘌呤浓度的关系建立工作曲线；第五步，利用所建立的电流与浓度工作曲线，依据某实测的电流大小，即可以确定血液中6-巯基嘌呤的含量。

本发明的标记物/多壁碳纳米管修饰石墨电极，其制备方法有两种：

第一种：以标记物为多吡啶钴配合物为例。先对石墨电极进行预处理，把配好的多壁碳纳米管悬浮液滴加到石墨电极表面，红外灯下烘干，制成多壁碳纳米管修饰石墨电极，然后将该修饰电极置于0.2毫摩尔/升多吡啶钴配合物的三羟甲基氨基甲烷/氯化钠缓冲溶液中，进行连续50次的电位扫描后，取出电极置于缓冲溶液中浸泡10分钟，即获得稳定的多吡啶钴配合物/多壁碳纳米管修饰石墨电极。

第二种：以标记物为多吡啶钴配合物为例。先对石墨电极进行预处理，把配制好的多壁碳纳米管悬浮液滴加到石墨电极表面，红外灯下烘干，制成多壁碳纳米管修饰石墨电极，用微量进样器移取5至15微升含5毫摩尔/升多吡啶钴配合物的三羟甲基氨基甲烷/氯化钠缓冲溶液滴到多壁碳纳米管修饰石墨电极表面，红外灯下烘干，然后在缓冲溶液中浸泡10分钟，即获得稳定的多吡啶钴配合物/多壁碳纳米管修饰石墨电极。

本发明同时提供了一种实现上述血液中6-巯基嘌呤电化学检测方法的装置。该装置包括工作电极、对电极、参比电极和电解池。

上述装置中的电极池为由塑料管制得的单孔电解池，由电解池的上池体和底盘组成。

上述工作电极为石墨电极，对电极为钛电极，参比电极为银/氯化银电极，钛对电极依池壁环状悬挂于检测溶液中，石墨工作电极和银/氯化银参比电极同时由环氧树脂固定于电解池底盘。