[发明专利]超临界二氧化碳法制备纳米盐酸小檗碱脂质体的方法

说明书

技术领域

本发明属涉及药物载体制备领域，具体地是一种纳米盐酸小檗碱脂质体的制备方法。

背景技术

药物与载体相结合形成药物载体系统后，药物的吸收和分布不再由药物本身决定，而 是受到载体理化性质的影响。根据临床要求选择适当的药物载体材料，不仅可以将药物输 送到靶器官，而且对于药物的理化性质和药理活性起到有益的作用。

盐酸小檗碱(黄连素)是从黄连、黄柏、三颗针等植物干燥根茎中提取出的一种异喹啉 类生物碱，过去主要应用于通过肠道给药来治疗胃肠炎、细菌性痢疾以及一般肠道感染等。 近年来的研究发现盐酸小檗碱对人类肝癌细胞，结肠肿瘤细胞，食管癌细胞系，恶性畸胎 瘤细胞、大鼠9L脑肿瘤细胞，Lewis肺癌细胞等都有一定的抑制和杀灭作用。但研究还 发现盐酸小檗碱体内抑瘤作用没有体外作用明显，可能是因为盐酸小檗碱肠道吸收较差， 在体内很难达到对肿瘤细胞直接作用的较高的血药浓度。盐酸小檗碱静脉给药，可能引起 药疹、过敏反应、血色素及红细胞减少、药敏性休克等副作用，1982年我国已经禁止使 用盐酸小檗碱静脉给药。由于盐酸小檗碱具有价格低廉，安全性高的特点，使其成为一种 值得在肿瘤防治方面深入研究的药物。因此，如何发挥盐酸小檗碱在癌症治疗上的效果， 抑制其副作用是我们面临的一大问题。为了提高盐酸小檗碱疗效，同时降低其毒副作用， 本专利提出制备纳米盐酸小檗碱脂质体的新方法。

脂质体是类脂双分子层形成的超微型球体，类似生物膜结构，它能将药物包裹于囊 内而成为一种新型药物载体。其基本组分磷脂是生物体内固有的成分，在生物体内经生物 转化而降解，无毒性及免疫原性，因此，脂质体被认为是最具发展前途的药物载体之一。

目前，制备脂质体的方法主要有薄膜分散法，逆向蒸发法，超声波分散法，冻融法， 冷冻干燥法，乙醇注入法，乙醚注入法，逆相蒸发法，表面活性剂处理法等，但上述制备 方法存在严重的缺点，如：产物中有机溶剂残留导致脂质体的安全性下降，颗粒单分散性 差不利于体系的稳定，药物的包封率低等。超临界二氧化碳流体是一种环境友好型溶剂， 在制备结束后易于与产物分离且不造成环境污染，并具备优良溶剂的特性。近几年来，随 着超临界二氧化碳流体技术的迅速发展，应用领域的不断扩大，其渐渐被应用于脂质体的 制备中。在脂质体制备过程中，超临界二氧化碳的优势主要表现在以下几个方面：第一， 与脂质体的其它制备方法比较，超临界二氧化碳法制备的脂质体粒径较为均匀，单分散性 高。第二，与蒸发、萃取或稀释等操作比较，利用超临界二氧化碳法制备的脂质体无有机 溶剂残留，为脂质体的安全临床应用提供了可能。第三，在孵化过程中，超临界二氧化碳 流体可以溶解磷脂中的小分子杂质，释放二氧化碳时杂质会同时被带离体系，以达到纯化 磷脂提高脂质体质量的作用。第四，超临界二氧化碳流体是一种新兴的优良溶剂，传质速 率高，这有利于孵化过程中药物分子从膜外向膜内的扩散，同时超临界二氧化碳流体是二 氧化碳气体在一定温度下经高压作用形成的，体系中的高压同样有利于药物进入脂质体的 内水相，进而提高脂质体的包封率。此外，超临界二氧化碳流体环境可以塑化磷脂分子的 结构，这种塑化作用有利于磷脂分子形成热力学更稳定的构象，使双分子层的排列更加均 匀，以达到提高脂质体稳定性的目的。上述优点说明超临界二氧化碳法在制备盐酸小檗碱 脂质体方面具有一定的优势。

发明内容

针对现有的制备脂质体的方法中普遍存在的产物中有机溶剂残留导致脂质体的安全 性下降，颗粒单分散性差不利于体系的稳定等缺陷，本发明提出一种超临界二氧化碳法制 备纳米盐酸小檗碱脂质体的新方法，以有效地克服传统制备方法中粒径不均匀、稳定性差、 包封率低、有机溶剂残留的缺点。

本发明采用的技术方案是：

根据超临界二氧化碳流体的传质均匀及速率高等特点，运用超临界二氧化碳流体作为 介质，制备单分散性好、药物包封率高的纳米盐酸小檗碱脂质体，并可通过调节制备压力 控制脂质体的尺寸。

依照上述技术方案，本发明的具体操作是：

1)成膜

称取适量卵磷脂及胆固醇置于圆底烧瓶中，卵磷脂与胆固醇的重量比为3.8-2.5：1。 再以体积比2.5-2：1配制的氯仿甲醇混合液，加入其中至将其溶解为止。完全溶解后， 在35-42℃恒温和氮气保护条件下，在旋转蒸发仪中成膜，然后抽真空使有机溶剂完全挥 发。

2)包封药物

a)盐酸小檗碱脂质体混悬液的制备