[发明专利]一种高纯度大豆皂苷A和B的制备方法

说明书

技术领域

本发明属大豆皂苷的制备领域，特别是涉及一种高速逆流色谱制备高纯度大豆皂苷A 和B的方法。

背景技术

大豆营养成分十分丰富，除用于制作食用油和饲料外，还可制成豆腐、豆乳、发酵食 品等大豆食品而被广泛食用。中、日、韩等东亚各国食用大豆食品的历史悠久。近年来流 行病学研究发现，与欧美人相比，东亚各国的妇女更年期症状较为轻微，骨质疏松发病率 较低，乳腺癌，前列腺癌等癌症以及心肌梗塞、动脉硬化等心血管疾病的发病率与死亡率 也较低。据认为，这与该地区人的饮食习惯，尤其是与日常饮食中摄入的大豆食品较多有 很大关系。因而，引发了研究与开发含有大豆成分的保健功能食品的热潮。大豆中的主要 有效成分有：(1)大豆蛋白与大豆肽类；(2)大豆异黄酮类：现已确认的有12种，主 要以3种异黄酮苷元(染料木黄酮、黄豆苷元和苷氨苷元)和它们的糖甙的形式存在；(3) 大豆卵磷脂类：磷脂酰胆碱(PC)，磷脂酰丝氨酸(PS)，磷脂酰肌醇(PI)和磷脂酰乙醇 胺(PE)；(4)大豆皂苷类：其分子是由低聚糖及齐墩果稀三萜缩合形成的一类化合物。 目前使用化学法研究大豆皂苷，确认大豆皂苷元有5个种类，即大豆皂苷元A、大豆皂苷 元B、大豆皂苷元C、大豆皂苷元D、大豆皂苷元E。日本学者北川勋和大久保一良对多 种豆类中的大豆皂苷进行了分析，认为在完整的皂苷中，天然存在的大豆皂苷有3种，即大 豆皂苷元A、大豆皂苷元B、大豆皂苷元E，其它的为DDMP组，均为水解状态下的人工 产物。

大豆皂苷A的结构式如下：

R₁＝CH₂OH    R₂＝β-D-GLc  R₃＝H

大豆皂苷B的结构式如下：

大豆皂苷是皂苷研究中起步较晚的一类，大豆皂苷具有明显的溶血作用，对人体健康 不利，被视为抗营养因子，同时它具有苦味，导致大豆制品具有苦涩味。因此在豆类食品 加工中总被设法除去。但近年研究表明，大豆皂苷的毒副作用很小，且具有许多对人体有 益的生理功效。它可降低血中胆固醇和甘油三脂含量，可预防高脂肪膳食所造成的高脂血 症，大豆皂苷通过增加SOD的含量，清除自由基，具有抗氧化和降低过氧化脂质的作用， 大豆皂苷具有抑制肿瘤细胞生长的作用，可抑制血小板减少和凝血酶引起的血栓纤维蛋白 形成，具有抗血栓作用。据报道，大豆皂苷对人类艾滋病毒的感染有一定的抑制作用，同 时还表现出对病毒感染的细胞有很强的保护作用，正是由于大豆皂苷的这些重要的生理作 用，决定了它在药物方面应用的广泛前景，国外报道，大豆皂苷最有可能被开发为治疗心 血管疾病的药物。

由于大豆皂苷是极性高的酸性皂苷，为复杂的化合组分，所以纯大豆皂苷的分离提取 比较困难。目前，工业上还没有大批生产，常规实验室提取方法也很难得到纯度较高的大 豆皂苷单体。

高速逆流色谱技术(High-SpeedCountercurrent Chromatography，HSCCC)是近30年 发展起来的一种连续的无需任何固体支持物的高效、快速的液液分配色谱分离技术，其原 理是利用螺旋柱在行星运动时产生的离心力，使互不相溶的两相不断混合，同时保留其中 的一相(固体相)，利用恒流泵连续输入另一相(流动相)，随流动相进入螺旋柱的溶质在 两相之间反复分配，按分配系数的次序，被依次洗脱。在流动相中分配比例大的先被洗脱， 反之，在固体相中分配比例大的后被洗脱。它避免了固态支持体或载体带来的各种问题， 如样品容易被吸附、损耗和变性，使其他液相色谱技术进行制备量分离时，其分配效率会 明显降低，溶剂消耗量大。现在已广泛应用于生物、医药、环保等领域化学物质的制备分 离和纯化，使其成为制备高纯度大豆皂苷A和大豆皂苷B的较佳手段。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供高速逆流色谱制备高纯度大豆皂苷A和大豆皂苷B的 方法。本发明制得的大豆皂苷A和大豆皂苷B纯度高，该方法具有回收率高，分离量大和 操作简便的特点。

本发明的一种高速逆流色谱制备高纯度大豆皂苷A和B的方法，包括：