[发明专利]调控调节性T细胞和Th17细胞相互转化的药物筛选方法

权利要求书

1.一种调控调节性T细胞和Th17细胞相互转化的药物筛选方法，其特征在于，具体步骤为：

第一步：将叉状头/翅膀状螺旋转录因子绿色荧光蛋白表达质粒转染入人肾上皮细胞中，通过荧光显微镜观测转染入的质粒是否表达，加入不同的待筛选药物，20-30小时后通过实时定量聚合酶联反应检测叉状头/翅膀状螺旋转录因子mRNA的表达，筛选出具有上调叉状头/翅膀状螺旋转录因子表达的药物；

第二步：培养小鼠幼稚性T淋巴细胞，加入第一步筛选得到的药物，60-80小时后实时定量聚合酶联反应检测叉状头/翅膀状螺旋转录因子mRNA的表达，筛选出上调该基因表达的药物，并进一步通过流式细胞仪检测CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺在CD4⁺T细胞中的百分率，验证该药物在蛋白水平上的作用；

第三步：培养小鼠幼稚性T淋巴细胞，加入转化生长因子-β和白细胞介素—6诱导向Th17细胞转化，同时加入通过第二步筛选得到的药物，60-80小时后通过实时定量聚合酶联反应检测Th17细胞核转录因子孤核受体γtmRNA的表达，筛选出下调该基因表达的药物，并进一步通过流式细胞仪检测CD4⁺IL-17⁺在CD4⁺T细胞中的百分率，验证该药物在蛋白水平上的作用。

2.如权利要求1所述的一种调控调节性T细胞和Th17细胞相互转化的药物筛选方法，其特征在于，第一步中所述的待筛选药物为芍药苷，维甲酸，黄芪甲苷，雷公藤甲素，蒿甲醚，天花粉蛋白，青藤碱，隐丹参酮和丹皮酚。