[发明专利]三聚氰胺的检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种三聚氰胺的检测方法，具体地，涉及一种液相色谱和质谱联用检测三聚氰胺的方法。

背景技术

近几个月来，在婴儿奶粉及其他奶类制品中发现混有大量三聚氰胺，三聚氰胺是一种化工原料，人体摄入过量的三聚氰胺会造成肾结石并对健康产生巨大的影响。目前对三聚氰胺的检测方法可分为三类：

(1)高性能液态色层分析法：这种方法是利用高性能液态色层分析仪器对化合物做一个分离和检测，其检测的方法通常是紫外吸收。

(2)气相色谱质谱联用法：这种方法是利用气相色谱对化合物进行分离，然后利用质谱鉴定化合物，它的灵敏度通常可以达到5PPB左右，其缺点是必须对三聚氰胺进行衍生化反应才能利用质谱检测，因此较为繁琐。

(3)液相色谱质谱联用法：这种方法是使用液相色谱和质谱联用对化合物进行分离鉴定，它的灵敏度也可达到5PPB以下，而且不需要做衍生化反应。液相色谱和质谱联用的方法是目前最灵敏最好的方法。该方法是先利用液相色谱对样品进行分离，再利用质谱对分离出来的成分进行鉴定。最常用的液相色谱方法是反相色谱分析，它是利用样品在反相色谱柱上保留，再使用含有高含量的有机溶剂的流动相予以洗脱。最常用的反相色谱柱是C18和C8色谱柱。三聚氰胺是一个亲水性非常好的化合物，它在反相色谱柱上几乎无法保留，因此无法对其进行分离。一般情况下，对于亲水性的化合物可以在溶剂中加入离子对试剂，离子对试剂可以和样品起交互作用，进而使其在反相柱上有保留而达到分离的效果。一般的离子对试剂具有很长的碳链，在尾端还键合有一个强酸或强碱基，从而和样品形成离子对并能使样品在反相柱上保留，可是一般离子对试剂都有较高的分子量不易挥发，因此无法和质谱联用，其他的方法，例如使用正相色谱分离三聚氰胺，可是众所周知正相色谱法稳定性不太好，柱效和分离效果也不如反相色谱柱，此外，高有机溶剂的流动相也容易使样品在进入质谱前的离子化不完全，从而降低了灵敏度。因此，目前需要建立一种新的用于检测三聚氰胺的反相液相色谱质谱联用的方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种新的用于检测三聚氰胺的反相液相色谱质谱联用(简称反相LC-MS)的方法，该方法简单、准确性好，可用于奶粉和鸡蛋等食品中三聚氰胺的检测。

本发明的三聚氰胺检测方法，是一种反相液相色谱质谱联用的方法，采用含有有机溶剂的水溶液作为流动相，在流动相中加入多氟羧酸和/或其盐。

本发明的三聚氰胺检测方法中，所述多氟羧酸是下述通式(1)和(2)所表示的化合物，所述多氟羧酸盐为下式(3)或(4)所表示的分子量为15～500的小分子有机盐，其中，这些多氟羧酸或多氟羧酸盐可以一种单独使用，也可以2种以上并用，

其中，m、n为1～20的整数；

其中，m、n、a、b为1～20的整数，且m+n≤20；

其中，m、n为1～20的整数，M为阳离子；

其中，m、n、a、b为1～20的整数，且m+n≤20，M为阳离子。

本发明的三聚氰胺检测方法中，发明人考察了多种可用的多氟羧酸，结果发现三氟乙酸(TFA)、七氟丁酸(HFBA)、3，3，3-三氟-2，2-二甲基丙酸、3，3，3-三氟-2-(三氟甲基)丙酸、五氟丙酸都可以添加到流动相中，其中优选三氟乙酸(TFA)和/或七氟丁酸(HFBA)。

本发明的三聚氰胺检测方法中，发明人考察了多氟羧酸在流动相中的含量，结果发现，当多氟羧酸的含量在0.05％～5％(v/v)的范围内，都可以获得良好的色谱峰。

本发明的三聚氰胺检测方法中，所述有机溶剂可以是液相色谱中常用的各种有机溶剂，其中优选甲醇和乙腈。此外，本发明考察了的甲醇水溶液的浓度范围，结果发现，甲醇的水溶液的浓度只要在5％～50％的范围内，就可以获得较为良好的色谱峰，但是从获得对称性和峰形更好的色谱峰的角度，优选10％～35％(v/v)。本发明也考察了乙腈水溶液的浓度范围，结果发现，乙腈的水溶液只要在2％～50％(v/v)的范围内，就可以获得较为良好的色谱峰，但是从获得对称性和峰形更好的色谱峰的角度，优选5％～30％(v/v)。

本发明的三聚氰胺检测方法中，使用C8或C18色谱柱作为色谱柱。