[发明专利]多种霉菌毒素定量检测蛋白芯片及其试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及蛋白芯片霉菌毒素检测产品，具体地说，涉及一种多种霉菌毒素定量检测蛋白芯片及其试剂盒。

背景技术

作为日常消费的大宗食品，粮油食品以及果汁饮料的霉菌毒素问题日益凸现，并受到业内人士的广泛关注。霉菌对食品和饲料的污染十分常见，除了引起变质外，还会产生具有“三致”(致畸、致癌、致突变)效应的霉菌毒素，不仅会使食品和饲料中的营养价值降低，还易导致人和牲畜中毒。据统计，每年全世界有25％的粮油作物污染霉菌菌毒素，联合国粮农组织估算由此造成的经济损失高达数千亿美元。

如何减少、控制霉菌毒素污染？普通的食物处理和烹饪方法不会减少黄曲霉毒素的含量，最佳方法是防止食品受污染或勿食用已污染的食品。而生产厂家在购进原料时就应该注意检测霉菌，以保证食品生产原料的安全、无毒。

鉴于霉菌毒素的毒性及其易污染食品的特性，世界各国相继建立或正在改进检测霉菌毒素的方法，引入了免疫学、生物化学、分子生物学技术，如金标法等。但目前国内检测食品霉菌毒素的试剂盒功能比较单一。专利号为98121677.3的专利“一种食品及饲料中真菌毒素特别是黄曲霉毒素B1的快速检测方法”，公开了一种用乳胶沉淀法测试黄曲霉毒素B1的方法；专利号为200710056557.7的专利“定量检测食品中赭曲霉毒素A含量试剂盒及其检测方法”，公开了用免疫学方法检测赭曲霉毒素A的试剂盒。这两种方法都基于免疫学原理，针对食品中的主要毒素做了检测。但随着食品工业化生产的发展，食品的种类日益增多，原料和成品质量检测处理量也日益增大，处理速度也要求跟上日益增加的生产速度，单一检测功能的试剂盒已经不能满足快速、高效的检测需求。

发明内容

本发明要提供一种多种霉菌毒素定量检测蛋白芯片及其试剂盒，能够一次性集成化检测多种霉菌毒素，解决当前食品业检测试剂功能单一，效率慢的问题，满足当前食品业的多元化、工业化发展需求。

本发明的技术方案如下：本发明提供一种多种霉菌毒素定量检测蛋白芯片，由基片和阵列式分布于基片上的买军毒素检测指标以及对照检测指标涂层组成，所述的霉菌毒素检测指标包括黄曲霉毒素B1、赭曲霉毒素A、伏马菌素、呕吐毒素、玉米赤霉烯酮、T-2毒素和展青霉素共7个霉菌毒素抗体，以共价键或非共价键固定在基片上面。所述的基片可以是玻璃片基，硝酸纤维素膜或尼龙膜。

上述基片的一个优选例是醛基化玻片。

上述涂层上的每个阵列中霉菌毒素检测指标每个有2-10个重复；阵列的多少和大小与待检样品的数目，基片大小，以及点样直径有关。

上述霉菌毒素检测指标与检测阵列的优选例是：当检测指标点样直径为0.1mm时，点间距0.6mm，阵列大小为6mm×5mm，可在硝酸纤维素膜蛋白芯片上设置24个阵列。

本发明还提供包含上述多种霉菌毒素定量检测蛋白芯片的试剂盒，用纸质模板固定于包装盒内。

上述试剂盒包括样本稀释液，酶标工作液，浓缩洗涤液、检测液、标准品、质控品；各试剂为液体瓶装，用纸质模板固定于包装盒内。不限放置方式，检测时配套使用。

上述的样本稀释液为样本提取浸液，可以由40％甲醇配制而成；

上述的酶标工作液由含有HRP标记的相应抗原的单克隆抗体，以及蛋白稳定剂组成；

所述的浓缩洗涤液为中性缓冲液；可以是磷酸盐缓冲液；

所述的检测液指配套使用的两种试剂，一种含有鲁米诺和化学发光增强剂，另一种含有过氧化氢。

上述的标准品由5-10个不同浓度梯度的霉菌毒素混合液组成，每个霉菌毒素混合液装入一个容器，霉菌毒素混合液由7个霉菌毒素指标按不同浓度混合而成。标准品用于在每次标本检测结束后做标准曲线，可以定量测定样品中的检测指标的浓度。

上述的质控品由2-6个不同浓度的霉菌毒素混合液组成，每个霉菌毒素混合液装入一个容器，霉菌毒素混合液由7个霉菌毒素指标按不同浓度混合而成。质控品可以监测整个检测系统的CV值，保证每次检测结果的有效性。

本发明选取了危害最大最广的几种霉菌毒素，包括黄曲霉毒素B1、赭曲霉毒素A、伏马菌素、呕吐毒素、玉米赤霉烯酮、T-2毒素和展青霉素共7个霉菌毒素抗体，构成检测指标。指标与污染对象、主要危害的对应关系见下表。