[发明专利]三聚氰胺快速检测试剂

说明书

技术领域

三聚氰胺快速检测试剂，应用免疫学原理，通过胶体金的免疫反应再借助免疫层析技术达到检测三聚氰胺目的，应用于快速检测鲜乳、乳制品、大豆制品、饲料、婴儿食品、宠物食品中的三聚氰胺。

背景技术

由于三聚氰胺是一种化工原料，毒性轻微，大鼠口服的半数致死量大于3克/公斤体重。据1945年的一个实验报道：将大剂量的三聚氰胺饲喂给大鼠、兔和狗后没有观察到明显的中毒现象。动物长期摄入三聚氰胺会造成生殖、泌尿系统的损害，膀胱、肾部结石，并可进一步诱发膀胱癌。1994年国际化学品安全规划署和欧洲联盟委员会合编的《国际化学品安全手册》第三卷和国际化学品安全卡片也只说明：长期或反复大量摄入三聚氰胺可能对肾与膀胱产生影响，导致产生结石。然而，2007年美国宠物食品污染事件的初步调查结果认为：掺杂了≤6.6％三聚氰胺的小麦蛋白粉导致宠物食品中毒。动物实验结果表明，其在动物体内代谢很快且不会存留，主要影响泌尿系统。三聚氰胺量剂和临床疾病之间存在明显的量效关系。三聚氰胺在婴儿体内最大耐受量为每公斤奶粉15毫克。专家对受污染婴幼儿配方奶粉进行的风险评估显示，以体重7公斤的婴儿为例，假设每日摄入奶粉150克，其安全预值即最大耐受量为15毫克/公斤奶粉。根据美国食物及药物管理局的标准，三聚氰胺每日可容忍摄入量为每日0.63毫克/公斤体重。

由于食品和饲料工业蛋白质含量测试方法的缺陷，三聚氰胺也常被不法商人用作食品添加剂，以提升食品检测中的蛋白质含量指标，因此三聚氰胺也被人称为“蛋白精”。蛋白质主要由氨基酸组成。蛋白质平均含氮量为16％左右，而三聚氰胺的含氮量为66％左右。通用的蛋白质测试方法“凯氏定氮法”是通过测出含氮量来估算蛋白质含量，因此，添加三聚氰胺会使得食品的蛋白质测试含量偏高，从而使劣质食品通过食品检验机构的测试。有人估算在植物蛋白粉和饲料中使测试蛋白质含量增加一个百分点，用三聚氰胺的花费只有真实蛋白原料的20％。三聚氰胺作为一种白色结晶粉末，没有什么气味和味道，所以掺杂后不易被发现。三聚氰胺含氮量为66.6％，是牛奶的151倍，是奶粉的23倍。每100g牛奶中添加0.1克三聚氰胺，理论上就能提高0.625％蛋白质。检测方案：在现有奶粉检测的国家标准中，主要进行蛋白质、脂肪、细菌等检测。三聚氰胺属于化工原料，是不允许添加到食品中的，所以现有标准不会包含相应内容。亦即三聚氰胺检测目前并无国家标准。牛奶和奶粉添加三聚氰胺，主要是因为它能冒充蛋白质。食品都是要按规定检测蛋白质含量的。要是蛋白质不够多，说明牛奶兑水兑得太多，说明奶粉中有太多别的东西的粉。但是，蛋白质太不容易检测，生化学家们就想出个间接的办法：因为蛋白质是含氮的，所以只要测出食品中的含氮量，就可以推算出其中的蛋白质含量。因此添加过三聚氰胺的奶粉就很难检测出其蛋白质不合格了这就是三聚氰胺的假蛋白。

目前检测三聚氰胺的方法主要有3种，高效液相色谱(HPLC)、气相色谱质谱联用法(GC-MS)和酶联免疫分析(ELISA)。存在的主要问题是设备投入大，操作时间长，专业要求高，不适合现场快速检测的要求，不适合大批量样品检测的要求。

发明内容

三聚氰胺快速检测试剂，应用免疫学原理，通过胶体金的免疫反应再借助免疫层析技术达到检测三聚氰胺目的，具有检测过程快速，操作方便，检测成本低等明显优点。

本发明方法是通过以下技术方案和工作原理实现的。特异性抗体(三聚氰胺抗体)标记在指示剂颗粒上，标记物附着在聚酯膜上；将相应完全抗原(三聚氰胺-BSA结合物)包被并固定层析膜的检测区(T)上，层析膜粘贴在底板上，始端有供加样用的样品处理部分，末端有供助层析用的滤纸组成试条，或将试条镶嵌入塑卡中，组成试剂。检测时，由于被测样本中相应抗原(三聚氰胺)和复溶的金标记抗体发生了免疫反应，此时混合液层析到检测区上时包被抗原无法竞争到标记抗体，检测区内没有出现反应线，即阳性，相反如被测样本没有被测抗原(三聚氰胺)，则标记的抗体层析到检测区时和包被膜上的抗原结合形成紫红线，即阴性。为了证明试剂有效性和易判读，分别在质控区(C)包被羊抗兔IgG为质控线，所以不管结果怎样质控线C始终出现。

三聚氰胺快速检测试剂，由下列部分组成：层析膜、含指示剂颗粒的聚酯膜、样品处理部分、滤纸和底板，检测鲜乳、乳制品、大豆制品、饲料、婴儿食品、宠物食品中的三聚氰胺。

附图说明

附图1是本发明实施例的结构示意图。

图中1.硝酸纤维素膜、2.滤纸、3.样品处理部分、4.底板、5.含胶体金颗粒的聚酯膜、6.试剂外壳。