[发明专利]双效蛭弧菌的发酵生产工艺

权利要求书

1.一种双效蛭弧菌的发酵生产工艺，包括下列步骤：

a)宿主菌混悬液的制备；

b)配制培养液：将pH6.5-8.0的磷酸盐缓冲液用水10倍稀释，然后加入CaCl₂和MgCl₂制成培养液，培养液中CaCl₂和MgCl₂含量均为10-100mg/L；

c)双效蛭弧菌的发酵：在所制成的培养液中，加入与培养液体积比为5％-30％的由步骤a制备的宿主菌混悬液，再加入与已加宿主菌混悬液的培养液体积比为2-3％的噬菌蛭弧菌液(含菌量大于10⁵pfu/ml)，在28-30℃温度条件下培养72-120小时，即制成双效蛭弧菌。

2.如权利要求1所述的发酵生产工艺，其特征在于步骤a中所述宿主菌可为大肠杆菌、非致病性的嗜水气单胞菌或假单胞菌中之一。

3.如权利要求1所述的发酵生产工艺，其特征在于步骤a中所述宿主菌为大肠杆菌时，发酵培养基含有下列重量份组分：氯化钠0.2，酵母粉0.1，蛋白胨0.2，消泡剂0.2；用氢氧化钠调pH6.5～6.8；定容至700L按0.1Mpa，121℃控制20min灭菌；发酵培养条件：接入大肠杆菌种子液约2000ml，控制罐温37±1℃，通气，控制罐压0.05MPa，培养24～30hr。

4.如权利要求1所述的发酵生产工艺，其特征在于步骤a中最后制得的宿主菌混悬液的含菌量为E6以上。

5.如权利要求1所述的发酵生产工艺，其特征在于步骤b培养液中CaCl₂和MgCl₂含量均为50mg/L。