[发明专利]一种动物纤维蛋白原病毒灭活方法

说明书

技术领域

本发明涉及动物纤维蛋白原，尤其是涉及一种动物纤维蛋白原病毒灭活方法。

背景技术

现有蛋白制品的病毒灭活/去除方法有其局限性，如S/D法(有机溶剂/表面 活性剂法)只对包膜病毒有效，因而导致蛋白制品的应用仍有一定的风险。有研究 报道静脉注射免疫球蛋白(IVIG)产品可能传播丙肝病毒，输注血浆蛋白制品可 能传播人类细小病毒B19。因此寻找一种能灭活所有病毒，且对蛋白制品活性影响 较小、操作方便的方法，将有助于提高蛋白制品应用的安全性，

1 γ射线灭活病原体的机理

大量实验证实γ射线辐照对各种微生物均有杀灭作用，包括有包膜和无包膜病 毒及所有的基因型物质。电离辐射对生物大分子的损伤既有能量传递的直接作用， 也有通过水的辐解反应大量产生自由基的间接作用，这两者之间除时间上有先后之 分外，在损伤的类型与机理等方面也存在一定差异。直接作用：离子射线的直接作 用主要是光子存储能量到“靶结构”上，这些能量的转移主要导致分子的外部电 子从分子上移位而破坏共价键。间接作用：间接作用主要是射线作用于水分子、氧 分子或其它的分子，形成高活性的自由基和活性氧，自由基和活性氧使病原体核酸 断裂。目前认为，传染因子的基因物质比蛋白生物制品更容易受到γ-射线的损伤， 这主要是由于两者物理特征(大小和密度)和化学结构的不同。生物大分子对射线 辐照的敏感性与其本身质量大小有关，实际上，几十年前人们就通过γ-射线灭活 病毒所需的剂量来估计病毒基因组的大小，一般情况下灭活微生物所需的剂量与微 生物的核酸大小成反比。

2 γ射线辐照消毒和灭菌的优点

与传统的消毒灭菌方法相比较，γ射线辐照有其独特的优点：①不使物品升温， 适用于忌热物品的消毒，除某些塑料、活细胞及其制剂外，许多医用物品都可用它 进行消毒灭菌；②穿透力强。射线可穿透被照物品的各个部位，一般不受物品包装、 形态的限制；③被照物品不会产生感生放射性，辐照后无残留毒性；④方法简便； ⑤省能，尤其适于大规模工业化处理。

3 γ射线辐照灭活蛋白制品中的病毒

一般情况下，20-50kGy剂量的γ射线辐照几乎能灭活所有的病毒，但灭活病 毒的同时，辐照剂量越大，对蛋白制品成分的损伤也越大，如何在灭活病毒的同时 又保留蛋白有效成分、不破坏蛋白成分的活性，这将是γ射线辐照应用于蛋白制品 病毒灭活的关键。有文献报道自由基对蛋白质的损伤主要表现在一级结构上的肽键 断裂、氨基酸组成变化和空间构象的β折叠的含量减少，紧密的结构趋于松散， 无规则卷曲明显增加。但也有实验表明将白蛋白浓缩液经水溶液稀释后用γ射线辐 照，下列条件可减少蛋白成分损伤：①白蛋白含量高；②加入辛酸钠；③低照 射剂量率；④缺氧状态。加入抗氧化剂或自由基清除剂，或者利用一种手段使辐照 过程中产生最小量的活性氧都可减少γ射线对蛋白成分的损伤。冻干状态下的蛋白 制品由于所含水分少，经电离辐射后所产生自由基少，对蛋白制品的损伤也会减弱。

综上所述，γ射线是一种有效灭活生物蛋白制品中病毒的方法。尽管对某些蛋 白制品生物活性有不同程度的影响，但如果能研制出效果好的蛋白保护剂，γ-射 线辐照技术将可用于蛋白制品的病毒灭活处理，蛋白制品的临床应用安全系数也会 得到明显提高。

发明内容

本发明的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种在保证有效 地杀灭可能污染的病原微生物的同时，维持生物材料的功能和结构的动物纤维蛋白 原病毒灭活方法。

本发明的目的可以通过以下技术方案来实现：一种动物纤维蛋白原病毒灭活方 法，其特征在于，该方法是将至少含一种生物材料及稳定剂的组成物质封装、冻干、 粉碎成冻干粉，在-10～40℃下进行20～40KGy的钴⁶⁰伽马射线的辐照。