[发明专利]γ-tmt和vte3基因共转化提高植物中维生素E含量的方法

权利要求书

1.一种γ-tmt和vte3基因共转化提高植物中维生素E含量的方法，其特征在于，从植物中克隆γ-tmt和vte3基因，构建含所述DNA分子的植物表达载体，用根癌农杆菌介导，将γ-tmt和vte3基因同时导入植物并筛选得到纯系植株，PCR检测外源目的基因γ-tmt和vte3的整合情况，高效液相色谱-紫外光检测器测定植物中维生素E含量，筛选获得维生素E含量提高的转基因植株。

2.根据权利要求1所述的γ-tmt和vte3基因共转化提高植物中维生素E含量的方法，其特征是，包括如下步骤：

(1)采用基因克隆方法获得植物维生素E关键酶基因γ-tmt和vte3；

(2)把γ-tmt和vte3基因可操作性地连接于表达调控序列，形成含γ-tmt和vte3基因的植物表达载体；

(3)将含γ-tmt和vte3基因的植物表达载体转化根癌农杆菌，获得用于转化植物的含γ-tmt和vte3基因植物表达载体的根癌农杆菌菌株；

(4)利用所构建的根癌农杆菌菌株转化植物，获得经PCR检测的转基因植株；

(5)对获得的转基因植株中维生素E含量进行高效液相色谱法及紫外光检测器测定，获得维生素E含量提高的转基因植株。

3.根据权利要求2所述的γ-tmt和vte3共转化提高植物中维生素E含量的方法，其特征是，所述的经PCR检测的转基因植株是指，分别设计合成γ-tmt和vte3基因的检测引物，进行DNA扩增，紫外线下观察到目的条带的阳性植株即为转基因植株。

4.根据权利要求2所述的γ-tmt和vte3基因共转化提高植物中维生素E含量的方法，其特征是，所述的高效液相色谱法及紫外光检测器测定植株中维生素E含量，通过如下方法：色谱柱C-18反相硅胶柱，流动相为甲醇∶水，甲醇∶水的体积比为98∶2，柱温30℃，流速1.0mL/min，进样量30μL，紫外光检测器检测波长292nm。