[发明专利]变性变构型环瓜氨酸多肽、及其融合蛋白、抗体和试剂盒

说明书

技术领域：

本发明涉及生物工程领域，尤其涉及变性变构型多肽，特别涉及一种变性变构型环 瓜氨酸多肽、及其融合蛋白、抗体和试剂盒。

背景技术：

类风湿关节炎(RA)是一种慢性、炎症性和系统性疾病，它常见的临床症状为手、 足关节的畸形、肿大。发病可发生持续性，可长达几周或几个月，并发的症状有急性现 象。类风湿关节炎(RA)在中国是一个常见的多发性自身免疫疾病。

类风湿关节炎(RA)疾病的早期可出现关节的疼痛、肿胀和牵拉紧张的感觉，同时 还可散在地并发非特异性的麻木、发热、疲累。最典型症状为系统性关节受累。随着病 程进展，受累的关节可发展到髋关节、肘关节和肩关节，并且产生运动疼痛，最终会发 展失去这些病发关节的功能。

在临床上对类风湿关节炎(RA)疾病持续六周的七个方面的表现可确诊为类风湿关 节炎(RA)。①关节运动受阻一小时以上；②关节炎发生三个以上关节；③关节炎发生 在手关节上；④对称性关节炎；⑤风湿性小结在关节上出现；⑥血清RF阳性；⑦X光显 示关节出现变形。

这也是早期临床用RF来作用类风湿关节炎(RA)的一部分标准，而最头疼的类风湿 关节炎(RA)很难与系统性红斑狼疮(SLE)和混合型结缔组织(MCTD)作鉴别诊断。 显然，目前在临床上用有RF、CCP、CRP、IgM-RF、GPI(本作者发明项目)等作多方 面的血清学类风湿关节炎(RA)的辅助诊断，但这些生物学指标的诊断都带有一定的局 限性、正确性、早期性、灵敏性及常有遗漏的问题，并且在方法学上的稳定性、方便性 和可行性都也存在不少的问题。

早在1998年Schellekens等人在世界上第一个报道了将蛋白翻译后精氨酸残基修饰的 而无正常功能的瓜氨酸多肽呈现在RA病人的血清中，并能与一些自身抗体反应。二年 后他又将一条有19个氨基酸残基组成的瓜氨酸肽链的二边各一个丝氨酸改变成半胱氨 酸，从而形成二硫键环状多肽，称为CCP。

发明内容：

本发明的目的在于提供一种变性变构型环瓜氨酸多肽、及其融合蛋白、抗体和试剂 盒，所述的这种变性变构型环瓜氨酸多肽、及其融合蛋白和试剂盒要解决现有技术中早 期诊断类风湿关节炎的方法不稳定、不方便的技术问题。

本发明提供了一种变性变构型环瓜氨酸多肽，其具有如下的氨基酸连接结构：

或者

本发明还提供了一种变性变构型环瓜氨酸多肽，其具有如下的氨基酸连接结构：

本发明还提供了一种变性变构型环瓜氨酸多肽，其具有如下的氨基酸连接结构：

本发明还提供了一种变性变构型环瓜氨酸多肽，其具有如下的氨基酸连接结构：

本发明还提供了一种变性变构型环瓜氨酸多肽，其具有如下的氨基酸连接结构：

本发明还提供了一种融合蛋白，所述的融合蛋白含有上述的变性变构型环瓜氨酸多 肽。

优选的，所述的融合蛋白中还含有牛血清白蛋白、或者锁孔蛋白、或者人或鼠免疫 球蛋白Fc端多肽蛋白。

具体的，所述的多肽分别在N-端链接半胱氨酸，然后与牛血清白蛋白、或者锁孔蛋 白、或者人或鼠免疫球蛋白Fc端多肽蛋白偶联。

本发明还提供了一种试剂盒，所述的试剂盒中含有上述的变性变构型环瓜氨酸多肽。

本发明还提供了一种试剂盒，所述的试剂盒中含有上述的融合蛋白。

本发明还提供了一种单克隆或多克隆抗体，所述的抗体抗上述的变性变构型环瓜氨 酸多肽。

本发明所呈现的发明是关于5个自主设计的变性变构型环瓜氨酸多肽，并针对类风 湿关节炎(RA)病人血清中的自身抗体而作为模拟自身免疫病的自身抗原。五个变性变 构型多肽的变性变构设计和合成，建立其与类风湿关节炎(RA)病人自身抗体的免疫反 应的专一性、高效性和早期检测性。本发明在与相关性靶标检测比较基础上还建立了几 种检测方法，同时对RA的自身抗原和自身抗体都进行了检测和比较，取得了临床诊断 的重大价值和深远意义。