[发明专利]高血压及血管病变疾病风险的遗传学检测芯片及其用途无效
申请号: | 200810204126.5 | 申请日: | 2008-12-05 |
公开(公告)号: | CN101748194A | 公开(公告)日: | 2010-06-23 |
发明(设计)人: | 高平进;张怡;朱鼎良 | 申请(专利权)人: | 上海市高血压研究所 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 北京金信立方知识产权代理有限公司 11225 | 代理人: | 朱梅;黄丽娟 |
地址: | 200025*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 高血压 血管 病变 疾病 风险 遗传学 检测 芯片 及其 用途 | ||
1.一种高血压及血管病变疾病风险的遗传学检测芯片,其包括固相载体和固定在所述固相载体上的探针,所述探针包括检测高血压及血管病变相关基因多态性的探针,所述探针与待测高血压及血管病变疾病风险相关基因的核苷酸序列和/或其互补序列进行杂交,其特征在于,所述待测高血压及血管病变疾病风险相关基因为OPN、ROKα和RhoA基因,所述探针包括:
(1)与待测OPN基因杂交的(a)SEQ ID NO:1~SEQ ID NO:33所示序列,(b)SEQ ID NO:1~SEQ ID NO:33所示序列中每条序列的互补链,和/或(c)与SEQ ID NO:1~SEQ ID NO:33所示的序列中每条序列有至少70%同源性的序列;
(2)与待测ROKα基因杂交的(a)SEQ ID NO:34~SEQ ID NO:48所示序列,(b)SEQ ID NO:34~SEQ ID NO:48所示序列中每条序列的互补链,和/或(c)与SEQ ID NO:34~SEQ ID NO:48所示的序列中每条序列有至少70%同源性的序列;
(3)与待测RhoA基因杂交的(a)SEQ ID NO:49~SEQ ID NO:54所示序列,(b)SEQ ID NO:49~SEQ ID NO:54所示序列中每条序列的互补链,和/或(c)与SEQ ID NO:49~SEQ ID NO:54所示的序列中每条序列有至少70%同源性的序列。
2.如权利要求1所述的高血压及血管病变疾病风险的遗传学检测芯片,其特征在于,所述探针为DNA、RNA、DNA-RNA嵌合体、PNA或其衍生物。
3.如权利要求1所述的高血压及血管病变疾病风险的遗传学检测芯片,其特征在于,所述探针可以被修饰。
4.如权利要求1所述的高血压及血管病变疾病风险的遗传学检测芯片,其特征在于,所述固相载体为玻片、硅片、硝酸纤维素膜、尼龙膜和高分子材料中的一种或它们的任意组合。
5.如权利要求1所述的高血压及血管病变疾病风险的遗传学检测芯片的使用方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)在固相载体表面点载权利要求1所述的探针;
(2)抽提待测样品的核酸;
(3)制备待测的高血压及血管病变相关基因的目的核苷酸序列;
(4)标记步骤(3)的目的核苷酸序列;
(5)在适于与步骤(1)所述的点载在固相载体上的探针进行杂交的条件下,加入经标记的目的核苷酸序列,并使其反应足够时间;
(6)检测杂交反应的结果。
6.如权利要求5所述的方法,其特征在于,步骤(4)所述目的核苷酸序列的标记包括荧光素标记、生物素标记、电化学发光标记、放射性元素标记或酶标记。
7.如权利要求1所述的高血压及血管病变疾病风险的遗传学检测芯片的使用方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)标记权利要求1所述的探针;
(2)抽提待测样品的核酸;
(3)制备待测的高血压及血管病变相关基因的目的核苷酸序列;
(4)在固相载体表面点载步骤(3)所述的目的核苷酸序列;
(5)在适于与步骤(4)所述的点载在固相载体上的目的核苷酸序列进行杂交的条件下,加入经标记的探针,并使其反应足够时间;
(6)检测杂交反应的结果。
8.如权利要求7所述的方法,其特征在于,步骤(1)所述的探针标记包括荧光素标记、生物素标记、荧光共振能量转移标记、电化学发光标记、放射性元素标记或酶标记。
9.如权利要求5或7所述的方法,其特征在于,所述步骤(3)的目的核苷酸序列的制备包括PCR扩增反应,该反应所用引物含有SEQID NO:55~SEQ ID NO:90所示序列的核苷酸链或其互补链。
10.如权利要求5或7所述的方法,其特征在于,所述步骤(5)中的杂交温度为25℃~65℃,杂交时间为2分钟~18小时。
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