[发明专利]乙型肝炎病毒核心抗体检测微粒、其制备及应用

权利要求书

1.一种乙型肝炎核心抗体的检测试剂盒，包括用于检测乙型肝炎核心抗体的检测微粒，所 述试剂盒还包括生物素标记的乙型肝炎核心抗原或亲和素包被的感光微粒中的一种或 两种；所述用于检测乙型肝炎核心抗体的检测微粒为乙型肝炎核心抗原包被的发光微 粒，所述发光微粒的表面官能团选自羧基或醛基；所述检测微粒经如下工艺制得：

a)混合：将发光微粒与乙型肝炎核心抗原混合于缓冲液中，所述发光微粒的粒径 范围为50-400nm，发光微粒与乙型肝炎核心抗原的质量比例为（8-15）：1；

b)反应：加入缓冲液配制的EDAC溶液混合并反应；

c)往步骤b获得的反应液中加入缓冲液配制的BSA溶液混匀并反应；

d)清洗产物，获得乙型肝炎核心抗原包被的发光微粒；

所述生物素标记的乙型肝炎核心抗原中，生物素与乙型肝炎核心抗原的分子比例为 （20-40）：1；所述用于检测乙型肝炎核心抗体的检测微粒为混悬液，用于检测乙 型肝炎核心抗体的检测微粒在混悬液中的浓度为100ug/ml-150ug/ml；所述生物素 标记的乙型肝炎核心抗原为混悬液，生物素标记的乙型肝炎核心抗原在混悬液中的 浓度为20ug/ml-30ug/ml。

2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述发光微粒的发光量为150,000-350,000光 子数/100μg发光微粒。

3.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述缓冲液为MES缓冲液。

4.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述发光微粒与乙型肝炎核心抗原的质量比 例为12.5：1。

5.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述步骤d的清洗的方式为离心法清洗。

6.如权利要求1所述乙型肝炎核心抗体的检测试剂盒，其特征在于，所述亲和素包被的感 光微粒中，亲和素与感光微粒的质量比例为1：（3-10）。

7.如权利要求1所述乙型肝炎核心抗体的检测试剂盒，其特征在于，所述用于检测乙型肝 炎核心抗体的检测微粒、生物素标记的乙型肝炎核心抗原以及亲和素包被的感光微粒分 别独立包装，且均为混悬液。

8.如权利要求7所述乙型肝炎核心抗体的检测试剂盒，其特征在于，所述混悬液的溶剂选 自HEPES缓冲体系或Tris缓冲体系。

9.如权利要求8所述乙型肝炎核心抗体的检测试剂盒，其特征在于，所述用于检测乙型肝 炎核心抗体的检测微粒混悬液的溶剂为pH8.0的成分为HEPES、NaCl和EDTA-Na-2H₂O的 HEPES缓冲液。

10.如权利要求8所述乙型肝炎核心抗体的检测试剂盒，其特征在于，所述生物素标记的乙 型肝炎核心抗原混悬液的溶剂为pH8.0的成分为Tris、NaCl和EDTA-Na-2H₂O的Tris缓 冲液。

11.如权利要求8所述乙型肝炎核心抗体的检测试剂盒，其特征在于，所述亲和素包被的感 光微粒混悬液的溶剂为成分为HEPES、NaCl和EDTA-Na-2H₂O的HEPES缓冲液。

12.如权利要求7所述乙型肝炎核心抗体的检测试剂盒，其特征在于，所述混悬液中还包括 蛋白保护剂、防止微粒聚集的稳定试剂或防腐剂中的一种或多种。

13.如权利要求1-12中任一权利要求所述乙型肝炎核心抗体的检测试剂盒，其特征在于， 所述检测试剂盒中还包括阳性对照和阴性对照。

14.如权利要求1-12中任一权利要求所述乙型肝炎核心抗体的检测试剂盒，其特征在于， 所述试剂盒中还包括多种浓度已知的乙型肝炎核心抗体溶液，不同浓度的乙型肝炎核心 抗体溶液分别独立包装。