[发明专利]一种中和CYR61的单克隆抗体(杂交瘤)及其应用

说明书

【技术领域】

本发明涉及一种单克隆抗体，尤其涉及一种能够中和CYR61的单克隆抗体及其应用和能产生单克隆抗体的杂交瘤。 

【背景技术】

类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis，RA)是最常见的风湿性疾病之一。RA是一种最常见的自身免疫病。全球RA患病率平均为0.5-1％。在我国，RA患病率为0.45％，而且每年的新增患病总人约为400万左右。RA的发病多为青壮年，由于没有特异性治疗药物控制疾病发展，大部分患者在发病的6-10年左右即由于致残而失去劳动能力，未经治疗的患者，其2年和3年的致残率可达50％和70％。因此，RA严重影响人民生命健康，同时也给我国正在发展健全的医保事业带来沉重负担，在一定程度上阻碍我国和谐社会的建设进程。 

RA的治疗没有特异性手段。目前的药物治疗及滑膜切除、关节置换等手术疗法只能缓解炎症和疼痛，而对软骨和骨的侵袭性破坏无效。因此深入研究RA的发病机制，寻找新的治疗靶点具有重要的理论和实际意义。虽然目前的抗TNF-a受体人源化抗体在抑制炎症病变的形成上有较好临床效果，但是该制剂对于中、晚期关节和滑膜已经有明显病变的患者效果不显著，而且只在部分患者中有效。因此，研究发现直接刺激滑膜和软骨病变的生物靶点、设计和发展针对这些生物靶点的干预手段极为重要。目前常用的干预手段有人源化单抗或者干扰SiRNA。但是，由于干扰SiRNA的长期转染技术至今不完善，目前仍不能用于体内。而人源化抗体的制备技术目前已经基本完善、国际上已经有多种人源化抗体上市并用于疾病治疗，均已获得良好效果，因此，选择有效生物靶点 采用人源化抗体进行中和是特异性治疗的重要途径。 

【发明内容】

本发明的目的是，提供一种单克隆抗体。 

本发明的再一的目的是，提供一种单克隆抗体的用途。 

为实现上述目的，本发明采取的技术方案是：一种由小鼠抗人CYR61单克隆抗体杂交瘤CGMCC NO.2766或CGMCC NO.2767分泌的单克隆抗体。 

所述分泌IgM的小鼠抗人CYR61单克隆抗体杂交瘤已保藏，保藏单位的名称中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏单位的地址：北京市朝阳区大屯路，中国科学院微生物研究所。保藏日期：2008年11月25日。保藏编号CGMCC NO.2766。所述分泌IgG的小鼠抗人CYR61单克隆抗体杂交瘤已保藏，保藏单位的名称中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏单位的地址：北京市朝阳区大屯路，中国科学院微生物研究所。保藏日期：2008年11月25日。保藏编号CGMCC NO.2767。 

为实现上述第二个目的，本发明采取的技术方案是：单克隆抗体在制备治疗风湿性疾病疾病药物中的应用。所述的风湿性疾病是类风湿性关节炎。 

依据上述技术方案，本发明的具体实施方法是： 

1、在基因芯片筛查的基础上，运用实时定量PCR方法分析了CYR61在RA患者不同组织中的表达格局。发现CYR61主要表达在RA患者的滑膜组织中，其相对含量是RA患者外周血单个核细胞的8.7倍、是RA关节液单个核细胞的13.3倍、正常人的外周血单个核细胞的125倍。同时用免疫组化的方法比较了RA、OA、正常人的滑膜组织中CYR61的表达情况，发现CYR61在RA滑膜组织 中表达明显高于OA患者和正常对照。进一步采用体外培养RA滑膜组织来源的FLS进行研究：用实时定量PCR发现CYR61在培养的FLS中表达高于滑膜组织；采用Western Blot方法比较了培养的RA、OA、正常人的FLS中CYR61蛋白的表达格局，明确了CYR61在RA患者的成纤维样滑膜细胞中的表达显著高于OA和正常对照，提示CYR61在RA滑膜组织病变中可能发挥着重要的作用。