[发明专利]仿生细胞外基质丝素蛋白/壳聚糖复合纳米纤维的制备方法

权利要求书

1.一种仿生细胞外基质丝素蛋白/壳聚糖复合纳米纤维的制备方法，包括

(1)丝素蛋白的提取：将去蛹蚕茧在100℃的质量百分比为0.5％Na₂CO₃水溶液中煮三次，每次30min，用蒸馏水充分洗净，于45℃烘干，将烘干后的蚕丝纤维以浴比1∶10溶解于三元溶剂，于70℃恒温水解1h，然后用蒸馏水透析72h，再放入—80℃预冻12h，然后在-58℃冷冻干燥，得到疏松的多孔状固体丝素蛋白；

(2)制备丝素蛋白溶液：将上述丝素蛋白溶于六氟异丙醇，常温下搅拌至完全溶解，得到浓度为4-10％g/ml的丝素蛋白溶液；

(3)制备壳聚糖溶液：将壳聚糖溶于六氟异丙醇HFIP和三氟乙酸TFA的混合溶剂中，搅拌至透明，得到浓度为4-8％g/ml的壳聚糖溶液；

(4)制备丝素蛋白和壳聚糖的混合溶液：将丝素蛋白溶液和壳聚糖溶液按体积比0.15-2.4:1混合，搅拌均匀，得到共混静电纺丝液；

(5)将丝素蛋白和壳聚糖混合溶液进行静电纺丝，调整静电纺丝工艺参数，控制电压为12-30千伏，电场距离为60-200毫米，纺丝速率为0.5-1.5毫升/小时，得到丝素蛋白/壳聚糖复合纳米纤维。

2.根据权利要求1所述的一种仿生细胞外基质丝素蛋白/壳聚糖复合纳米纤维的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中的三元溶剂为CaCl₂、C₂H₅OH和H₂O的混合液，其中CaCl₂、C₂H₅OH和H₂O的摩尔比为1:2:8。

3.根据权利要求1所述的一种仿生细胞外基质丝素蛋白/壳聚糖复合纳米纤维的制备方法，其特征在于：所述步骤(3)中的六氟异丙醇HFIP和三氟乙酸TFA的混合溶剂，其中六氟异丙醇HFIP和三氟乙酸TFA的体积比为9:1。

4.根据权利要求1所述的一种仿生细胞外基质丝素蛋白/壳聚糖复合纳米纤维的制备方法，其特征在于：所述步骤(4)中的丝素蛋白占溶质总质量分数的10％-80％，壳聚糖占溶质总质量分数的20％-90％。

5.根据权利要求4所述的一种仿生细胞外基质丝素蛋白/壳聚糖复合纳米纤维的制备方法，其特征在于：所述的溶质为丝素蛋白和壳聚糖。

6.根据权利要求1所述的一种仿生细胞外基质丝素蛋白/壳聚糖复合纳米纤维的制备方法，其特征在于：所述的丝素蛋白/壳聚糖复合纳米纤维的直径随纺丝溶液浓度增大逐渐增大，随壳聚糖含量的增加逐渐减小。

7.根据权利要求1所述的一种仿生细胞外基质丝素蛋白/壳聚糖复合纳米纤维的制备方法，其特征在于：所述的丝素蛋白/壳聚糖复合纤维可应用于生物医学领域组织工程的研究。