[发明专利]一种检测核酸点突变的方法

权利要求书

1.一种用于检测核酸点突变的探针，其特征在于，所述探针的结构如式I所示：

Z-L-B    (式I)

式中，

B表示探针与靶核酸结合的核酸结合区；

Z表示可有可无的固相载体；

L是连接臂；当Z不存在时，L是用于将B连接于Z的连接臂；当Z存在时，L是已经将B与Z相连的连接臂；

并且，所述的探针与靶核酸结合的结合区B具有式II所示的5’-3’结构：

S1-P1-S2-P2-S3    (式II)

式中，

P1和P2分别是一个碱基，其中的一个是针对突变位点的碱基，该碱基与野生型序列互补但与突变型序列不互补，或者该碱基与野生型序列不互补但与突变型序列互补；而另一个是辅助性的不匹配碱基，该碱基既与野生型序列不互补，也与突变型序列不互补；

S1是与野生型序列和突变型序列互补的结合区5’端核苷酸序列，其长度为X1个碱基；

S2是与野生型序列和突变型序列互补的结合区中部核苷酸序列，其长度为X2个碱基；

S3是与野生型序列和突变型序列互补的结合区3’端核苷酸序列，其长度为X3个碱基；

其中，X1、X2和X3的长度差的绝对值同时满足以下条件：

|X1-X2|≤4；

|X3-X2|≤4；

|X1-X3|≤4；

并且|X1-X2|+|X3-X2|+|X1-X3|≤8。

2.如权利要求1所述的探针，其特征在于，|X1-X2|+|X3-X2|+|X1-X3|≤6，更佳地|X1-X2|+|X3-X2|+|X1-X3|≤4，最佳地|X1-X2|+|X3-X2|+|X1-X3|＝0。

3.如权利要求1所述的探针，其特征在于，X1、X2和X3的长度差的绝对值同时满足以下条件：

|X1-X2|≤3；

|X3-X2|≤3；

|X1-X3|≤3。

4.如权利要求1所述的探针，其特征在于，X1、X2和X3的长度差的绝对值同时满足以下条件：

|X1-X2|≤2；

|X3-X2|≤2；

|X1-X3|≤2。

5.如权利要求1所述的探针，其特征在于，所述的探针与靶核酸结合的结合区B的长度为15-25个碱基，更佳地为16-22个碱基。

6.如权利要求1所述的探针，其特征在于，所述的连接臂的长度为8-30个碱基。

7.如权利要求1所述的探针，其特征在于，所述的固相载体是荧光编码微球、膜条或玻片。

8.一种检测核酸样品是否存在点突变的检测方法，其特征在于，包括步骤：

将权利要求1所述的探针与待检测核酸样品进行杂交，并检测是否形成“待检测核酸-探针”杂交复合物，其中未形成所述的杂交复合物就表示样品存在所述的点突变，而形成所述的杂交复合物就表示样品存在所述的点突变。

9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，该方法还包括将检测结果与阳性对照和阴性对照进行比较。

10.一种用于核酸点突变的试剂盒，其特征在于，包括：容器以及位于容器中的权利要求1所述的探针。