[发明专利]微生态复合菌剂及微生态复合菌剂的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种微生态制剂的制备方法。 

背景技术

随着生活节奏的加快、食品种类和样式的增加，以及环境污染、乱用抗生素等因素导致人体肠道内微生态环境紊乱，致使人体内积毒引发便秘、腹泻、肝炎和其他消化道疾病，严重的甚至会威胁生命。除了注意饮食卫生、均衡膳食、加强体育锻炼外，采用微生态制剂重新构建肠道内健康微生态环境是一种理想的方法。 

目前的微生态制剂中益生菌的活菌数量少(都低于3亿个/克)，且制备后益生菌的活菌数随时间的增加而降低(1.5年活菌数仅为制备之初的50％～55％)，因此现有的微生态制剂调节能力差、保质期短。(目前市场常用微生态制剂的指标如表1所示。) 

表1 

由于现有的微生态制剂中益生菌活菌的数量少，加之人体肠道内环境的紊乱已不利于益生菌的存活；所以，服用现有的微生态制剂只能够在短时间内、暂时性的增加和补充人体肠道内益生菌的数量，却不能使益生菌在人体肠道内“有效”的存活，因此益生菌难以在人体肠道内形成规模，导致竞争力差、生存能力差，往往停止服用一段时间后益生菌便消磨殆尽，只有继续补充新的益生菌才能达到“短暂”的缓解。因此，现有的微生态制剂并不能从根本上调节和改善人体肠道的内环境。 

发明内容

本发明的目的是为了解决现有的微生态制剂只能够在短时间内、暂时性的增加和补充人体肠道内益生菌的数量，却不能使益生菌在人体肠道内“有效”的存活，导致益生菌难以形成规模，竞争力差、生存能力差，往往停止服用一段时间后益生菌便消磨殆尽的问题，而提供的一种微生态制剂的制备方法。 

微生态复合菌剂主要由纳豆芽孢杆菌、乳酸克鲁维酵母菌、嗜酸乳杆菌和大豆低聚糖组成；每克微生态复合菌剂中纳豆芽孢杆菌、乳酸克鲁维酵母菌和嗜酸乳杆菌的活菌总数为1.0×10¹⁰～9.9×10¹⁰个，纳豆芽孢杆菌、乳酸克鲁维酵母菌与嗜酸乳杆菌的菌落数比为1～3∶1～3∶1～3；微生态复合菌剂中大豆低聚糖的质量占微生态复合菌剂总质量的10％～30％。 

微生态复合菌剂按以下步骤进行制备：一、分别对纳豆芽孢杆菌、乳酸克鲁维酵母菌和嗜酸乳杆菌进行培养；二、扩大培养；三、将乳酸克鲁维酵母菌、嗜酸乳杆菌和纳豆芽孢杆菌分别转入相应的高菌浓度培养液继续培养至菌落浓度为1.0×10⁷～9.9×10⁹个/mL，然后在0～4℃、5000～10000r/min的条件下离心15～50min；四、将三种菌体离心沉淀物分别放入含有脱脂乳粉、海藻糖、甘油、蔗糖、谷氨酸钠的保护剂中，然后在-10～-70℃的环境中预冻10～24h，再在无菌条件下真空冷冻干燥，三种菌的冻干粉等质量混合后加入大豆低聚糖，即得到微生态复合菌剂；其中步骤四中大豆低聚糖的加入量占微生态复合菌剂总质量的10％～30％；步骤四中菌体离心沉淀物与保护剂的重量比为1～9∶10，保护剂中脱脂乳粉的质量浓度为10％、海藻糖的质量浓度为1％、甘油的质量浓度为1％、蔗糖的质量浓度为1％、谷氨酸钠的质量浓度为0.1％。 

本发明微生态复合菌剂采用“三菌一剂”的生态构架：选用了能够产生吡啶二羧酸和抗菌肽的纳豆芽孢杆菌，具有生态夺氧、促进消化吸收作用的乳酸克鲁维酵母菌，人体内源性益生菌嗜酸乳杆菌，以及大豆低聚糖组成。本发明微生态复合菌剂中有益菌活菌总数为1.0×10¹⁰～9.9×10¹⁰个/克，不仅单位数量巨大且2年后活菌存活率仍高于98％。本发明微生态复合菌剂服用后在人体肠道内以菌促菌(不仅“三菌”之间相互促进，也同时促进人体肠道内其它有益菌的生长)、以菌治菌(抑制人体肠道内有害菌和条件致病菌的存活)，加之单位数量巨大且存活率高，可以在人体肠道内迅速壮大有益菌群数量，并有效的抑制有害菌的生长和繁殖，从而占据并主导人体肠道内环境，达到调节和改善人体肠道内环境的目的，克服了补充、消耗、再补充益生菌的不良循环，从根本上改善人体肠道内环境，实现了有益菌的长期有效。 

本发明微生态复合菌剂适用于婴幼儿、老年人和各种菌群失调症状的人群，有效率达96％以上，并可作为癌症和术后患者的辅助治疗，能有效增强患者体质、促进康复。本发明微生态复合菌剂可通过胃肠道、口腔进行给药，还 可以通过泌尿生殖道和皮肤给药用于调整泌尿生殖道及皮肤的微生态环境。 

本发明微生态复合菌剂的制备方法可以保证微生态复合菌剂中的活菌数量及存活率。 

具体实施方式