[发明专利]一种检测铜绿微囊藻毒素的方法

权利要求书

1、一种检测铜绿微囊藻毒素的方法，其特征在于检测铜绿微囊藻毒素的方法按以下步骤实现：一、将含有铜绿微囊藻的水样震荡、混均，然后抽取30～40mL震荡混均液放入离心管中，在温度为3～5℃、离心速度为6500～7500r/min条件下，离心处理10～15min，弃掉上清液；二、离心沉淀物再用去离子水洗涤，然后在温度为3～5℃、离心速度为6500～7500r/min条件下，离心处理2～3min，弃掉上清液；三、重复步骤二1～2次，收集离心沉淀物；四、将离心沉淀物溶于5～6mL的去离子水中，得到铜绿微囊藻毒素提取样样品；五、将铜绿微囊藻毒素提取样离心浓缩至2～3mL，然后倒入具塞玻璃试管并加盖，而后在沸水浴中处理13～17min，然后冷却至温度为3～5℃，在离心速度为11000～13000r/min条件下，离心处理10～15min后，取上清液避光待用；六、离心后上清液中加入CCl₄，萃取15min，充分混均然后静置至两相分层，弃掉有机相，将水相在滤膜厚度为0.45μm的条件下过滤；七、抽取50μL过滤后样品采用高效液相色谱法进行检测；其中步骤七中检测参数：反相柱为C₁₈，柱长为250mm，内径为4.6mm，填料粒径为5μm，色谱柱温度为40℃，流动相为0.1％的磷酸水溶液与甲醇按40∶60的体积百分比混合，流速为1mL/min，检测器为紫外可见光，检测器波长为238nm。

2、根据权利要求1所述的一种检测铜绿微囊藻毒素的方法，其特征在于步骤一中离心速度为6800～7200r/min。

3、根据权利要求1或2所述的一种检测铜绿微囊藻毒素的方法，其特征在于步骤一中离心处理时间为11～14min。

4、根据权利要求3所述的一种检测铜绿微囊藻毒素的方法，其特征在于步骤四中将离心沉淀物溶于5.2～5.8mL的去离子水中。

5、根据权利要求1、2或4所述的一种检测铜绿微囊藻毒素的方法，其特征在于步骤五中将铜绿微囊藻毒素提取样离心浓缩至2.2～2.8mL。

6、根据权利要求5所述的一种检测铜绿微囊藻毒素的方法，其特征在于步骤五中在沸水浴中处理时间为14～16min。

7、根据权利要求1、2、4或6所述的一种检测铜绿微囊藻毒素的方法，其特征在于步骤五中离心速度为11500～12500r/min。