[发明专利]敬钊缨毛蜘蛛毒素提取物—敬钊毒素—V在制备镇痛药物中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种多肽活性物质在医用配制品中的用途，尤其是敬钊缨毛蜘蛛毒素提取物—敬钊毒素—V在制备镇痛药物中的用途。

背景技术

ZL 200610031864.5号专利申请公开了从敬钊缨毛蜘蛛粗毒中提取分离出新型神经毒素—敬钊毒素—V(简称敬钊镇痛肽)的方法。敬钊镇痛肽是一种新型哺乳动物神经毒素，其化学结构为由29个氨基酸残基以特定的顺序组成的多肽，含有三对链内二硫键，其化学结构如下式：

发明内容

本发明的目的旨在提供敬钊缨毛蜘蛛毒素提取物—敬钊毒素—V在制备镇痛药物中的应用，这种镇痛药物既能够明显减轻病人的疼痛，且没有类似吗啡的成瘾毒副作用。

本发明所述的敬钊镇痛肽的化学结构式如图1所示，其中Y为酪氨酸，C为半胱氨酸，Q为谷氨酸，K为赖氨酸，W为色氨酸，M为甲硫氨酸，T为苏氨酸，D为天门冬氨酸，S为丝氨酸，R为精氨酸，A为丙氨酸，E为谷氨酸，G为甘氨酸，L为亮氨酸，I为异亮氨酸。敬钊镇痛肽可作为单一有效活性组份用于制备镇痛药物。

镇痛药物是一类能够减轻疾病痛苦的物质，不仅能够选择性地减轻或缓解疼痛感觉，也可以缓解因剧烈疼痛而引起的恐惧、紧张及焦虑等不愉快的情绪。目前的镇痛药物可以分为解热镇痛药和麻醉性镇痛药物两类，前者以阿斯匹林为代表，通过对组织中前列腺素合成过程的抑制作用，减轻神经末梢对致痛物质的敏感性，主要用于解除炎症性疼痛和其他钝疼；后者以吗啡为代表，其作用部位主要在丘脑和皮层，作用于中枢神经系统中的μ-型阿片受体，以缓解锐痛、钝痛和内脏绞痛，从而产生镇痛作用，主要用于各种疾病所引起的疼痛和手术后病人的严重疼痛，特别是晚期癌症疼痛。但是目前这种以吗啡为代表的麻醉性镇痛药物存在成瘾性强，戒断症状严重，病人必须不断增加剂量才能维持镇痛效果，而且最终导致对这类药物失效，同时对神经损伤性疼痛无疗效等主要缺点。

本发明的敬钊镇痛肽是通过与特异性分布于外周神经元上的河豚毒素不敏感型钠离子通道亚型(Navl.8、Navl.9)以及河豚毒素敏感型钠离子通道亚型Navl.7结合，抑制相关的电压门控钠离子通道电流而阻断痛觉神经信号的传导，因此具有明显的镇痛作用，但没有明显的毒副作用。

附图说明

下面将结合附图与动物药理实验对本发明作进一步的详细说明。

图1敬钊镇痛肽的化学结构。

图2敬钊镇痛肽硬膜外注射对福尔马林所致大鼠强直性疼痛的镇痛作用。

图3肌肉注射敬钊镇痛肽对福尔马林所致大鼠强直性疼痛的镇痛作用。

图4肌肉注射敬钊镇痛肽对手术后疼痛的镇痛作用。

具体实施方式

为了更好的理解和更充分的公开本发明，下面将通过大鼠硬膜外注射与肌肉注射两种用药途径，采用大鼠福尔马林致炎疼痛实验动物模型与手术后实验动物疼痛模型来说明敬钊镇痛肽的镇痛作用。

实验1：硬膜外注射敬钊镇痛肽对福尔马林所致大鼠强直性疼痛的镇痛作用。

1)实验用主要原料：实验用敬钊镇痛肽是从敬钊缨毛蜘蛛粗毒中分离纯化而得到，同时通过HPLC和MALDI-TOF质谱仪鉴定，其纯度为98％以上；PE-10型聚乙烯管为美国Befon-Dickson公司生产；SD实验大鼠由中南大学湘雅医学院动物房提供，体重180-220g之间，肌注生理盐水与肌注吗啡均购自湖南师范大学校医院。

2)给药途径：硬膜外注射是目前手术后病人与晚期癌症病人进行镇痛的常用给药方式，该方式具有有效作用集中持久，毒副作用小等优点。

具体操作如下：手术前先用盐酸氯胺酮0.4-0.6ml麻醉大鼠，剪掉两耳后方的毛，酒精棉消毒，然后切开大鼠颈后部皮肤，依次分离肌层，暴露出寰枕膜，用五号针挑开寰枕膜与第一颈椎之间的结膜，但不挑破寰枕膜，然后将早已准备好的PE-10聚乙烯管插入硬膜外腔，插入深度为7.5cm，直达腰膨大处，插管方法与Yaksh等人报道的方法相一致，在管的开口处预先用封口膜缠一小结球以确定插入深度，缝合小球固定在颈背肌。用火星封暴露在外的PE-10管口以防感染。手术口涂碘酒消毒。手术后注射20万单位青霉素钠消炎。实验结束后，注入10μL滂胺天兰染料，解剖后观察插管位置是否正确。术后动物均单笼饲养，恢复一周，选择状态正常大鼠分为6组，每组10只，分别是生理盐水对照组，吗啡阳性对照组和4个敬钊镇痛肽溶液剂量组。