[发明专利]一种中药何首乌蛋白质的提取方法及其应用

权利要求书

1.一种中药何首乌蛋白质的提取方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)将何首乌的干燥块根粉末，加入正已烷浸没，脱脂2～3次，每次4～6小时；

(2)离心，回收溶剂，风干残渣；

(3)按1g何首乌的干燥块根粉末：60～70mL的比例加入50mmol pH为7.4的Na₂HPO₄- NaH₂PO₄缓冲液，4～6℃搅拌10～15小时，在4～6℃、12000～13000rpm条件下冷冻离心 10～15min，得上清液A；

(4)残渣再按1g何首乌的干燥块根粉末：40～50mL的比例加入上述缓冲液，4～6℃搅 拌9～11小时，在4～6℃、12000～13000rpm条件下冷冻离心10～15min，得上清液B；

(5)残渣再按1g何首乌的干燥块根粉末：30～40ml的比例加入上述缓冲液，4～6℃搅 拌7～9小时，在4～6℃、12000～13000rpm条件下冷冻离心10～15min，得上清液C；

(6)合并上清液A、B和C，即得缓冲提取液，向其中缓慢加入粉末状硫酸铵，边加边 搅拌，冷冻离心收集硫酸铵饱和度从40％起至70％的区间范围内的沉淀，冷冻离心的条件为： 4～6℃，11000～12000rpm，15～20min；

(7)将所得沉淀转移至透析袋，4～6℃，用双蒸水透析36～48小时，每隔6～8小时换 一次双蒸水；

(8)在4～6℃、11000～12000rpm对透析截留液进行冷冻离心15～20min，上清液过 sephadexG75柱，用双蒸水洗脱，收集280nm有吸收峰的洗脱液，冷冻干燥即得中药何首乌 蛋白质。

2.权利要求1所述方法制备的中药何首乌蛋白质在制备增强免疫力药物中的应用。