[发明专利]多孔微球及其在制备多孔微球疫苗中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物可降解多孔微球及其应用，特别是涉及可吸附抗原蛋白的多孔微 球及其在制备多孔微球疫苗中的应用。

背景技术

鼠疫是由鼠疫耶尔森氏菌引起的烈性传染病。近年来，世界鼠疫疫情呈上升趋势， 2000年世界卫生组织将鼠疫列为重新抬头的传染病。另外，鼠疫耶尔森氏菌又是一种 标准的生物战剂和生物恐怖剂，美国已将鼠疫耶尔森氏菌列为恐怖分子最有可能使用 的6个生物剂之一。

鼠疫灭活疫苗仅对腺鼠疫有一定的保护作用，而且保护时间短，因此这类疫苗不 适合于大规模的预防接种。美军曾在越战中使用的USP灭活疫苗已于1999年停止生产。 EV76疫苗株是最好的减毒活疫苗，能提供早期的保护作用，但减毒活疫苗副作用严重 (Russell P，Eley SM，Hibbs SE，Manchee RJ，Stagg AJ，Titball RW：A comparison of Plague vaccine，USP and EV76 vaccine induced protection against Yersinia pestis in a murine model.Vaccine 1995，13(16)：1551-1556.)。亚单位疫苗能 够克服传统疫苗的许多缺陷，不含有感染性组分，无致病性，而且对腺鼠疫和肺鼠疫均 具有一定的免疫保护作用。因此，目前鼠疫疫苗的研究多集中在亚单位疫苗。鼠疫耶 尔森氏菌的主要保护性抗原是F1(荚膜抗原)(Andrews GP，Heath DG，Anderson GW， Jr.，Welkos SL，Friedlander AM：Fraction 1 capsular antigen(F1)purification from Yersinia pestis C092 and from an Escherichia coli recombinant strain and efficacy against lethal plague challenge.Infect Immun 1996， 64(6)：2180-2187.)和LcrV(V-抗原)(Anderson GW，Jr.，Leary SE，Williamson ED，Titball RW，Welkos SL，Worsham PL，Friedlander AM：Recombinant V antigen protects mice against pneumonic and bubonic plague caused by F1-capsule-positive and-negative strains of Yersinia pestis.Infect Immun 1996，64(11)：4580-4585.)。F1抗原由鼠疫耶尔森氏菌pMT1质粒上的F1操纵子编码， 以多聚体的形式在细胞表面形成荚膜，F1抗体通过阻断F1蛋白的抗吞噬作用从而具有 免疫保护作用(Du Y，Rosqvist R，Forsberg A：Role of fraction 1 antigen of Yersinia pestis in inhibition of phagocytosis.Infect Immun 2002， 70(3)：1453-1460.)。V抗原是一种多功能蛋白，与鼠疫耶尔森氏菌的抗吞噬能力有 关，具有免疫保护和免疫抑制作用(Pettersson J，Holmstrom A，Hill J，Leary S， Frithz-Lindsten E，von Euler-Matell A，Carlsson E，Titball R，Forsberg A， Wolf-Watz H：The V-antigen of Yersinia is surface exposed before target cell contact and involved in virulence protein translocation.Mol Microbiol 1999， 32(5)：961-976.)。虽然基于F1抗原与V抗原的新型疫苗对腺鼠疫和肺鼠疫均有效， 但F1抗原不能代表鼠疫耶尔森氏菌的全部毒力(Titball RW，Williamson ED： Yersinia pestis(plague)vaccines.Expert Opin Biol Ther 2004，4(6)：965-973.)。 最近，研究人员发现在云南感染东方型鼠疫耶尔森氏菌的病人血清中检测不到V抗原 的抗体，提示某些鼠疫菌株的V抗原不具有免疫保护作用(Li B，Jiang L，Song Q，Yang J，Chen Z，Guo Z，Zhou D，Du Z，Song Y，Wang J et al：Protein microarray for profiling antibody responses to Yersinia pestis live vaccine.Infect Immun 2005，73(6)：3734-3739.)。因此，目前鼠疫疫苗的研究多采用F1和V抗原联合应用 的方案。