[发明专利]一种大鼠慢性后肢缺血模型的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种慢性后肢缺血动物模型的制备方法，属于医学生物技术领域和 实验动物学领域。

背景技术

据国外的资料统计，在美国每年有超过15万人因为下肢的严重缺血而不能行介入 或者手术治疗，随着动脉硬化的不断进展，下肢缺血不断加重。最后患者只能选择截 肢。近几年随着再生医学的不断发展，不断有新的治疗性血管新生手段出现如：将各 种生长因子导入缺血部位，以达到血管新生(angiogenesis)或者血管生成 (arteriogenesis)的目的。动物试验发现如：骨髓干细胞，细胞因子(VEGF，bBGF等) 都可以有效的促进血管生成或者血管新生以改善下肢血供，为临床治疗无流出道，严 重的慢性下肢缺血患者提供了新的治疗思路，但是以上的治疗手段应用到临床后效果 却难以领人满意，当然，原因是多方面的，但不可否认的是，其中一个重要的原因是 目前在研究治疗性血管新生手段和机制时，所利用的动物模型都是急性下肢缺血模型， 不能全方面的反应慢性下肢缺血后机体的各种病理生理变化特点。

目前国内外研究肢体缺血所用动物模型都是基于急性缺血，制备方法主要是通过 结扎股动脉，髂外动脉，或者剥脱股深动脉的方法造成下肢的急性缺血，在急性缺血 的后期一般是被认为是慢性缺血过程。文献报道在发生急性缺血后，局部产生的剪切 力；炎性反应；内皮主细胞的局部浸入，以上三大机制都在短时间内参与血管新生和 生成。

但是在临床上我们面临的往往是在动脉硬化的基础上造成下肢的慢性缺血，长期 的慢性缺血使下肢肌肉通过改变代谢方式以及肌纤维的构型来适应对缺血的改变，从 而避免了如急性下肢缺血所造成的坏死，炎性反应，而不是通过局部血管急性代偿后 改善下肢血运的。综上所述，急性下肢缺血与临床慢性下肢缺血有诸多方面存在差异， 目前应用的急性后肢缺血动物模型并不适合研究的需要。

我们知道动物模型对研究疾病的发生发展及治疗有着重要意义，准确的动物模型 应该具有稳定可靠，重复性强，制备简单等特点。肢体缺血模型在国内外应用极为广泛， 但是有关肢体缺血模型的专门研究却一向少见。即使在相关的文献中对该模型的叙述 也甚少。

就目前的参考文献来看，缺血状态有暂时缺血和慢性缺血之分。前者多用于缺血 预处理和缺血再灌注的研究之中，其制作方式有两种：一是外用止血带止血器或绷带 等环扎于肢体根部，过一段时间后再放开，以此达到暂时缺血的目的；另一种是分离局 部的供血动脉，或用动脉夹暂时夹闭血流。

急性缺血是肢体缺血模型的主流，应用最为广泛其制作方法大体上以结扎并切除 后肢的供血动脉主干或其分支为主。但是在大多数的动物模型制作过程中，如果结扎 并切断某一支供血动脉的近端，通常引起远端肢体缺血坏死的情况并不多见：据报道犬 的下肢缺血模型需要结扎14支动脉，包括盆腔动脉，髂总动脉股总动脉和它们的分支。 经过6周以后，这些犬的患肢能恢复到大致正常的血流水平。切断兔的髂总动脉形成的 肢体缺血只能维持17天，30天以后，兔不表现出严重的后肢缺血。

也有研究者采用其它方式制作肢体缺血模型：如边杰芳等在制作犬后肢缺血模型 时，在股动脉壁切一小口，向远端插入螺旋状金属丝一根，缝合一针固定金属丝，然后缝 合动脉切口使金属丝留在股动脉内。Gale L.Tang于大鼠股动脉根部加上ameroid constrictor(一种可吸水收缩的材料)后，使股动脉外径逐渐缩窄从而达到制备慢性下肢 缺血模型的目的。但此类模型也存在诸如：下肢缺血时间维持时间短；物理性缩窄血 管外径于临床病变相差甚远；缺血时间不易控制等缺点，所以其制作出的缺血模型其具 体效果仍待验证。

目前国内外尚无其他慢性下肢缺血模型的报道。

发明内容

本发明要解决的第技术问题是提供一种慢性后肢缺血动物模型的制备方法。

为实现上述目的，本发明采取以下技术方案：

一种慢性后肢缺血动物模型的制备方法，在实验动物的股动脉中插入线栓材料至 膝关节附近，缝合切口；造成动脉管腔狭窄并产生异物反应，使管腔内逐渐产生内膜 增生，逐渐造成下肢血流的减少，建立慢性后肢缺血动物模型。