[发明专利]SM22抗原多肽、自身抗体在制备检测肿瘤试剂盒中的应用及含有该多肽的检测试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及一种SM22抗原多肽，更具体地说是一种肿瘤标记物SM22抗原多肽，自身抗体在制备检测肿瘤试剂盒中的应用及含有该多肽的检测试剂盒，属于生物工程领域。

背景技术

目前人类对肿瘤的诊断主要还是依靠影像学和病理学技术手段，患者大多在有明显占位病变和临床症状后才得以诊断，多数患者已经到中晚期，很难得到有效的治疗。而且，现在临床上缺少对肿瘤发展过程有效的监测指标，从而导致早期诊断困难。因此，建立和发展适合临床试用的可以监测肿瘤发生发展的分子标志物，用该肿瘤标记物制备诊断试剂盒或治疗药物，对于肿瘤的诊断和治疗具有积极的作用。

肿瘤是一种涉及到多基因、多蛋白的复杂性疾病。过去三十年中，人们通过对一些单基因的克隆和鉴定获得了一批与肿瘤相关的基因或蛋白，同时对这些基因或蛋白的生物学功能和在肿瘤细胞中的变化进行了测定。由于这些工作多数是在各种肿瘤细胞系中进行的，因而到目前为止，这些研究结果在用于指导肿瘤临床的诊断和治疗方面有很大的局限性。其中一个重要的问题是不能较全面的获得准确的基因、蛋白和机体代谢改变的规律。

随着分子细胞生物学研究和生物信息学的发展，一些新的技术手段不断涌现，越来越多组的概念的提出，肿瘤研究也进入了一个新的纪元。人们开始系统肿瘤生物学的研究，希望实现基因、蛋白和生物代谢研究的统一，获得的大量实验研究数据将有助于人类认识肿瘤生物学本质，并转化为肿瘤防治的有效技术手段。

近年来，蛋白质组分析技术的高速发展极大地推动了肿瘤标记物的研究。由于蛋白质组学可以高通量、高效的分析在肿瘤发生过程中发生了变化的蛋白，包括量的上下调和修饰形态的改变，已经成为筛选肿瘤标志物的有效手段。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种特异性肿瘤标志物SM22抗原多肽及其衍生物。

本发明的第二目的在于提供一种特异性肿瘤标志物SM22抗原多肽制备的抗体。

本发明的再一个目的是提供该在SM22抗原多肽在制备检测肿瘤试剂盒中的应用。

为了实现上述目的，本发明的发明思路为：利用蛋白质组学技术筛选出了胃癌相关蛋白SM22，并且对其进行了克隆表达，制备了抗体，进一步研究可应用于临床诊断和研发药物的靶标。

本发明的技术方案为：

一种SM22抗原多肽，其具有序列表中SEQ ID No.1所示氨基酸序列。发明人根据胃癌组织中上调的SM22基因序列，克隆表达了SM22蛋白全长，经镍柱纯化后，获得了纯度较高的SM22抗原蛋白。采用高纯度的抗原免疫兔子，获得了高效价的多抗，经ELISA和Western Blotting检测，证实其特异性和灵敏性。

上述的一种SM22抗原多肽的衍生序列，其是由SEQ ID No.1所示氨基酸序列经氨基酸残基的取代、缺失或添加而形成的氨基酸衍生序列，其氨基酸序列如SEQID No.2所示。

一种能与上述SM22抗原多肽特异性结合的抗体。

SM22抗原多肽在制备检测肿瘤试剂盒中的应用。

一种检测肿瘤的试剂盒，其含有辣根过氧化物酶标记的SM22抗原多肽特异性结合的抗体，所述抗体浓度为100ng/ml。

本发明的优点及有益效果：

(1)本发明SM22抗原多肽具有极强的特异性，为潜在的肿瘤标志物。

(2)本发明克隆了其全长并且制备了对应的抗体，兼具免疫反应的高特异性和高敏感性；其可以制备检测肿瘤尤其是胃癌的试剂盒，检测效率高，使用方便，该试剂盒具有较高的应用价值。

(3)在肿瘤生物学研究中，本发明表达的抗原可应用于研究蛋白质的相互作用等，产生的抗体可应用于Western blotting，免疫荧光和免疫组化等。

(4)此外，SM22蛋白的表达和抗体的制备为进行肿瘤发生发展的研究，揭示肿瘤发展规律，以及研究适合临床诊断及治疗的试剂材料提供了重要素材。本发明还可以作为新药研发的靶标，为抗肿瘤药物研发提供新的研究素材。

下面结合附图和具体实施方式对本发明做进一步说明，以使本领域技术人员可以更清楚的得知本发明的技术方案，并非对本发明的限制。

附图说明

图1为胃癌组织(T)与癌旁正常组织(N)蛋白质谱。所用胶条为pH3-10NL，每块胶上样蛋白量为200μg。

图2为SM22在8对胃癌组织中的差异表达T和N分别代表胃癌组织和癌旁正常组织。图中椭圆标示区域为差异点。