[发明专利]一种新型IZ-shGITRL融合蛋白及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及基因工程领域。具体的说，本发明涉及新的可溶性IZ-shGITRL融合蛋白，利 用基因工程技术生产该可溶性融合蛋白的方法以及该融合蛋白的鉴定。本发明还涉及利用该 融合蛋白预防或治疗与hGITRL相关疾病的方法。

背景技术

自身免疫性疾病和恶性肿瘤是涉及到多系统(如内分泌系统、消化系统和呼吸系统)的 常见病、多发病，与机体的免疫失衡密切相关。

人类的糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体的相关配体(human glucocorticoid-induced tumor necrosis factor receptor ligand，hGITRL)属于TNF家族II型跨膜蛋白，又称TNFSF18，其 胞外区与其它TNF家族配体有20％的同源性，胞外区位于多肽链的C’端(aa52～aa177)。近年 来研究表明，hGITRL基因位于人染色体1q23，编码由177个氨基酸组成的II型跨膜蛋白产物， 包括胞浆区28个氨基酸、跨膜区21个氨基酸和胞外区128个氨基酸。人类GITRL(hGITRL)和鼠 类GITRL(mGITRL)的同源性为51％。GITRL蛋白主要表达在抗原递呈细胞(APC)表面，如DC、 B细胞、内皮细胞、巨噬细胞等，静息或活化的T细胞不表达(Shin HH等(2002年)Cytokine， 19(4)：187-192；Kim J D等(2003年)Genes Immun，4：564-569；Yu K Y等(2003年)Biochem Biophys Res Commun，310：433-438)。

糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子相关受体蛋白(glucocorticoid-induced tumor necrosis factor receptor，GITR)又被称为活化诱导的肿瘤坏死因子受体(activation-induced tumor necrosis factor receptor，AITR)。1997年Nocentini等人在地塞米松诱导T细胞杂交瘤细胞中发现GITR， 与TNFRSF中的4-1BB、CD27、OX40及CD40具有一定的同源性。GITR是TNFRSF的第18位成 员，又称TNFRSF18。天然CD4⁺CD25⁺Treg细胞组成性高表达GITR；静息或活化的T细胞也表 达，其膜表达量会随着T细胞的激活而增加(Nocentini G等(2005年)European Journal of Immunology，35(4)：1016-1022；Hanabuchi S等(2006年)Blood，107(9)：3617-3623)，而GITR 被其配体蛋白(GITRL)激活后，可呈现增强效应T细胞的活化和取消Treg细胞的抑制功能的特 点(Ronchetti S等(2004年)European Journal of Immunology，34(3)：613-622)。