[发明专利]用NaCI溶液从凝胶中回收DNA或RNA的方法

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及回收DNA、RNA的方法。

背景技术

从琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶中回收DNA或RNA是一种常用技术，目的是分离和纯化DNA或RNA片段。目前最常用的是用离心柱分离纯化试剂盒进行操作，然而此类试剂盒比较昂贵，一般实验室无力购买，导致不能广泛应用。因此急需一种价格低廉，能够广泛应用的从琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶中回收DNA或RNA方法。

发明内容

本发明的任务是提供一种用NaCI溶液从凝胶中回收DNA或RNA的方法，实现以价格便宜和容易得到的NaCI溶液回收凝胶中DNA或RNA片段，以克服现有技术使用离心柱分离纯化试剂盒进行操作而导致价格昂贵，不能广泛应用的不足。

实现本发明的技术方案是：

1.用3-4倍体积的0.4M NaCI，4℃，洗脱琼脂糖凝胶中的DNA或聚丙烯酰胺凝胶中的RNA；

2.加入3-4倍无水乙醇，混匀，置冰上至少2小时或于-20℃过夜，以沉淀DNA或RNA。

本发明提供的这种用NaCI溶液从凝胶中回收DNA或RNA的方法，包括以下步骤：

1.取一干净1.5ml EP离心管，称取其重量；

2.切取含DNA或RNA条带的凝胶，放入1.5ml EP离心管中；

3.再次称取离心管重量，并计算凝胶重量；

4.尽量倒碎凝胶，以便加入NaCI溶液后DNA或RNA快速从凝胶中析出；

5.加入3-4倍体积(V/W)的0.4M NaCI溶液；

6.震荡混匀1分钟，然后置于4℃过夜，对DNA或RNA进行洗脱，其间混摇2-3次以促进DNA或RNA析出；

7.吸取上清，加入3-4倍无水乙醇，混匀；

8.置冰上至少2小时或于-20℃过夜，以促进DNA或RNA沉淀；

9.4℃14,000rpm离心15分钟，以沉淀DNA或RNA；

10.吸取上清，空气干燥后加适量TE或水溶解，4℃或-20℃保存备用。

以本发明方法回收RNA时，要使用无RNA酶的试剂和器具。

本发明方法所得DNA的回收率一般在60-80％之间；RNA的回收率一般在90-100％之间。本发明方法实现了以价格便宜和容易得到的NaCI溶液回收凝胶中DNA或RNA片段，克服了现有技术使用离心柱分离纯化试剂盒进行操作而导致价格昂贵，不能广泛应用的不足。

具体实施方式

实施例1

1.取一干净1.5ml EP离心管，称取其重量；

2.切取含DNA或RNA条带的凝胶，放入1.5ml EP离心管中；

3.再次称取离心管重量，并计算凝胶重量；

4.尽量倒碎凝胶，以便加入NaCI溶液后DNA或RNA快速从凝胶中析出；

5.加入3-4倍体积(V/W)的0.4M NaCI溶液；

6.震荡混匀1分钟，然后置于4℃过夜，对DNA或RNA进行洗脱，其间混摇2-3次以促进DNA或RNA析出；

7.吸取上清，加入3-4倍无水乙醇，混匀；

8.置冰上至少2小时或于-20℃过夜，以促进DNA或RNA沉淀；

9.4℃14,000rpm离心15分钟，以沉淀DNA或RNA；

10.吸取上清，空气干燥后加适量TE或水溶解，4℃或-20℃保存备用。